[發明專利]檢測和/或鑒定腺伴隨病毒(AAV)序列以及分離所鑒定的新型序列的方法

在審

• 申請號: 201310326978.2
• 申請日: 2002-11-12
• 公開（公告）號: CN103555678A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: G·高;J·M·威爾森;M·阿爾維拉
• 申請（專利權）人: 賓夕法尼亞大學托管會
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N15/35;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C07K14/015;A61K48/00
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 余穎

1.一種重組腺伴隨病毒(AAV)，包含功能性AAVrh.10衣殼，所述衣殼由vp1蛋白、vp2蛋白和vp3蛋白構成，其中，所述vp1衣殼蛋白具有SEQ?ID?NO:81中1至約738位氨基酸構成的序列或與SEQ?ID?NO:81中1至738所構成氨基酸序列至少95%相同的序列，所述重組AAV還包含小基因，所述小基因具有3’和5’AAV反向末端重復序列和與調節序列操作性相連的轉基因編碼序列，所述調節序列指導所述轉基因編碼序列在宿主細胞中的表達。

2.如權利要求1所述的重組AAV，其中，所述氨基酸序列與SEQ?ID?NO:81中1至738位氨基酸至少99%相同。

3.如權利要求1所述的重組AAV，其中，所述vp2蛋白具有SEQ?ID?NO:81中138至738構成的序列。

4.如權利要求1所述的重組AAV，其中，所述vp3蛋白具有SEQ?ID?NO:81中203至738構成的序列。

5.如權利要求1-4中任一項所述的重組AAV，其中，所述反向末端重復序列來自相對于AAVrh.10而言的異源AAV。

6.一種組合物，包含權利要求1-5中任一項所述重組AAV和生理相容性載體。

7.一種分離的蛋白，包含選自以下所述的AAV衣殼蛋白：vp1衣殼蛋白，SEQID?NO:81中1至738位氨基酸；vp2衣殼蛋白，SEQ?ID?NO:81中138至738位氨基酸；和vp3衣殼蛋白，SEQ?ID?NO:81中203至738位氨基酸。

8.一種分離或合成的核酸分子，包含編碼權利要求7所述蛋白的核酸序列。

9.如權利要求8所述的核酸分子，所述核酸序列選自：SEQ?ID?NO:59中的vp1、vp2或vp3。

10.如權利要求8或9所述的核酸分子，包含編碼AAV衣殼蛋白和功能性AAV?rep蛋白的一段AAV序列。

11.一種產生含AAV衣殼的重組腺伴隨病毒的方法，包括培養含有以下物質的宿主細胞的步驟：(a)權利要求8所述編碼AAV衣殼的分子；(b)功能性rep基因；(c)包含AAV反向末端重復序列和轉基因的小基因；和(d)將小基因包裝到AAV衣殼蛋白內所需足夠的輔助功能。

12.一種宿主細胞，轉染了權利要求8至10中任一項所述核酸分子，所述轉染體外進行。