[發明專利]一種雙向伯克霍爾德氏菌及其培養方法和應用

無效

• 申請號: 201310326671.2
• 申請日: 2013-07-30
• 公開（公告）號: CN103540542A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發明（設計）人: 楊忠緒;張小榮
• 申請（專利權）人: 西安西諾農化有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01N63/02;A01P3/00;A01P1/00;C12R1/01
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技術領域

本發明屬于植物保護（微生物農藥）領域，具體涉及一種雙向伯克霍爾德氏菌及其培養方法和應用。?

背景技術

植物病原菌（包括真菌、細菌、病毒等）引起的植物病害給農業生產造成了重大的經濟損失。目前，防治水稻、香蕉等重要植物病害的主要方法是使用殺菌劑。但是殺菌劑的大量使用具有增加病原菌抗藥性的風險，并且會對環境造成嚴重的污染，對人畜健康也構成威脅，而生物防治是一種對環境友善的防治植物病害的新途徑。?

植物周圍不僅存在病原菌，還存在著大量的非病原菌，其中有的還是病原菌的拮抗微生物。這些拮抗微生物可通過與病原菌的抗生作用、競爭作用、重寄生作用及誘導植物產生系統抗性等機理來抑制病原菌，達到防治植物病害的目的。此外，拮抗微生物對環境安全，不像化學農藥那樣會造成環境污染以及對人畜的毒害，同時拮抗微生物不易使病原菌產生耐藥性，有些還具有促進植物生長的作用，且實際生產工藝簡單。因此，利用拮抗微生物來防治植物病害的研究越來越受到國內外的重視。目前，人們已經分離到多種對各種不同植物病害有不同程度防治效果的拮抗微生物，其中有些已經進入實際應用階段，產生了相當可觀的社會效益和環境效益。?

目前對伯克霍爾德氏菌屬（Burkholderia）的研究已較多，主要集中在應用該屬內的菌株產生酶或用于治理環境污染，如以下專利文獻：公開號1195373（日本，中山美香等，公開日2004/03/24）的降解鹵代烴的微生物及應用；公開號1484703（日本，早出廣司，公開日2004/03/24）的葡萄糖脫氫酶和生產該脫氫酶的方法；公開號1867676（日本，山口將憲等，公開日2006/11/22）的鯊肌醇的制備方法；公開號101198695（德國，貝賽林等，公開日2008/06/11）的生產脂肪酶的方法；公開號101153272（中國，盛下放等，公開日2008/04/02）的一種鉛鎘抗性細菌及其用于土壤重金屬污染的植物修復方法；公開號102046778A（日本，古賀一治、增田紳吾，公開日2011/05/04）的降低植物體中的重金屬含量的細菌；公開號101671636（中國，郭軍康等，公開日2010/03/17）的一種抗重金屬植物促生菌制劑及其施用方法。但以上文獻都沒有涉及到植物病原菌生物防治的相關應用。?

在植物病害的生物防治方面，任嘉紅等發現吡咯伯克霍爾德氏菌JK-SH007對楊樹潰瘍病具有防治效果（任嘉紅等，吡咯伯克霍爾德氏菌JK-SH007抗菌蛋白的分離純化，微生物學通報，2010-06-20；任嘉紅等，吡咯伯克霍爾德氏菌JK-SH007的發酵條件及其對楊樹潰瘍病的防治效果，中國生物防治，2010-08-08；葉建仁等，一種吡咯伯克霍爾德氏菌及其在防治楊樹潰瘍病中的應用，中國專利，2009-10-14；）；查傳勇發現雙向伯克霍爾德氏菌Lu10-1能夠產生抗菌活性物質（查傳勇等，雙向伯克霍爾德氏菌Lu10-1產生抗菌活性物質的發酵培養基和發酵條件優化，蠶業科學，2009-06-15）；林善海等發現伯克霍爾德氏菌對香蕉褐緣灰斑病具有防治效果（林善海等，拮抗伯克霍爾德氏菌對香蕉褐緣灰斑病的生物防治試驗，中國植物病理學會2007年學術年會論文集，2007-08-01）。?

雖然目前研究已表明伯克霍爾德氏菌可用于拮抗某些植物病原菌，但是篩選、鑒定對植物病原菌抑制作用顯著的拮抗微生物，以及對該種微生物進行大規模培養和應用仍是十分必要的。?

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術中各種植物病原真菌和細菌引起的植物病害化學藥劑防治副作用大、生物防治藥物缺乏的缺陷，提供一種可抑制包括香蕉炭疽病菌和水稻紋枯病菌在內的多種植物病原菌的廣譜生防菌株。?

本發明通過以下技術方案實現上述目的：?

一種雙向伯克霍爾德氏菌，分類命名為：雙向伯克霍爾德氏菌Burkholderia?ambifaria，于2013年4月14日保藏于中國典型培養物保藏中心，地址：中國.武漢.武漢大學，430072，保藏編號CCTCC?NO：M2013145，培養物名稱：雙向伯克霍爾德氏菌PPMMD。該菌株的16S?rDNA序列如SEQ?ID?NO:1所示。?

本發明還提供了一種生物菌劑，該生物菌劑含有上述雙向伯克霍爾德氏菌或含有上述雙向伯克霍爾德氏菌發酵液（即培養液）經過濾后的無菌濾液，所述無菌濾液優選用上述雙向伯克霍爾德氏菌培養液經過離心取得的上清再經過細菌過濾器過濾獲得。?