[發明專利]用于食品中羅丹明B快速檢測的表面增強拉曼光譜法及試劑配方與使用方法

在審

• 申請號: 201310323913.2
• 申請日: 2013-07-30
• 公開（公告）號: CN103604793A
• 公開（公告）日: 2014-02-26
• 發明（設計）人: 鄒明強;張孝芳;李莉;劉彩虹;齊小花;劉峰
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于食品中羅丹明B快速檢測的表面增強拉曼光譜法，其特征在于，使用中性氧化鋁作為分散劑，中性氧化鋁與食品試樣按一定比列混合、研磨勻質，加入一定量的提取劑，采用超聲提取，將提取液吹干復溶，進行離心，小心吸取離心后中間層的勻質試液加入至預先加好一定量試劑A和試劑B的檢測池中，渦旋或搖振均勻，置檢測池于拉曼光譜儀檢測室中進行拉曼光譜掃描檢測，依據所獲得的拉曼光譜圖，選用特征波數1646cm^-1處進行羅丹明B的拉曼光譜信號測試，以外標法，根據羅丹明B的拉曼光譜信號強度與羅丹明B含量的線性比例關系，對食品試樣中羅丹明B進行現場快速的定量和定性檢測。

2.根據權利要求1所述的食品中羅丹明B快速檢測的表面增強拉曼光譜法，其步驟如下：

(1)試樣前處理：

a.辣椒油試樣：按辣椒油與分散劑的體積比為1∶2稱取，優選稱取辣椒油試樣2g和中性氧化鋁4g，混合、研磨勻質；加入80％甲醇水溶液20mL，渦旋或搖振0.3～1min；用超聲法提取10min；取上清液于45℃氮吹至近干，以1mL水進行復溶，離心，過0.22μm濾膜過濾，待測；

b.辣椒醬試樣：按辣椒醬與分散劑的體積比為1∶3稱取，優選稱取辣椒醬試樣2g和中性氧化鋁6g，混合、研磨勻質；加入80％乙腈水溶液5mL，渦旋或搖振0.3～1min；用超聲法提取10min；取上清液于45℃氮吹至近干，以1mL水進行復溶，離心，過0.22μm濾膜過濾，待測；

(2)檢測：

a.小心吸取離心后均質試液加入至預先加好一定量試劑A和B的檢測池中，渦旋或搖振均勻，進行拉曼光譜掃描檢測；

b.采用外標法并選用特征波數為1646cm^-1對羅丹明B進行拉曼光譜測試，根據羅丹明B的拉曼光譜信號強度與羅丹明B含量的線性比例關系，進行試樣中羅丹明B快速定量和定性檢測。

3.根據權利要求1所述的食品中羅丹明B快速檢測的表面增強拉曼光譜法，其特征在于，試劑A為銀膠體水溶液，按照公知的方法制備即可；試劑B為可使A凝聚的含Cl^-1的電介質。所述的電介質，其特征在于：Cl^-1的濃度范圍為0.25M～0.65M，優選為0.55M；pH為1-9，優選為3。所述試劑A、B的用量如下：

(1)試劑A：100-300μL，優選為100μL；

(2)試劑B：100-300μL，優選為100μL。

(3)根據權利要求1、2所述的食品中羅丹明B快速檢測的表面增強拉曼光譜法，其特征在于，勻質試液加入量為200-500μL，優選為400μL。

4.根據權利要求1所述的食品中羅丹明B快速檢測的表面增強拉曼光譜法，其特征在于，所使用的拉曼光譜檢測儀可以是手持式、便攜式或臺式儀器，應具備發射波長為785nm的激光光源，其波數誤差＜15cm^-1，目前中國檢驗檢疫科學研究院、必達泰克公司等單位可提供滿足測試要求的便攜式拉曼光譜儀。

5.根據權利要求1所述的所述的食品中羅丹明B快速檢測的表面增強拉曼光譜法，所述拉曼光譜儀，其操作步驟為：

(1)取樣：取50-500μL檢測試劑A于檢測池中，加入100μL檢測試劑B，小心吸取離心后的勻質試液200、400μL或500uL于檢測池中；

(2)儀器參數設置：調激光能量參數和積分時間參數得拉曼光譜儀最佳的拉曼峰強度，調連續掃描光譜次數，得最佳平均的掃描光譜；

(3)掃描：用拉曼光譜儀在200～2500cm^-1的范圍內掃描測試樣品。

6.根據權利要求1所述的食品中羅丹明B快速檢測的表面增強拉曼光譜法，其數據采集及結果分析步驟為：

(1)選定某一特征波數下的拉曼信號峰所對應的強度為內標基準，進行譜圖歸一化；

(2)用具有背景扣除功能的數據處理軟件進行數據處理，獲得基線平坦的拉曼圖譜；

(3)定性分析：采集食品試樣的拉曼光譜圖，如羅丹明B對應的特征峰1646cm^-1處出現了明顯的拉曼峰，且信噪比≥3，則初步判斷為添加了羅丹明B的陽性樣品，如特征波數1646cm^-1沒有明顯的峰，則初步判斷為沒有添加羅丹明B的陰性樣品；

(4)定量分析：根據特征波數1646cm^-1特征波數處羅丹明B所對應的相對信號強度與其濃度的線性關系做標準曲線，用該標準曲線可對食品中羅丹明B進行定量分析。