[發明專利]一種二肽衍生物在殼聚糖溶液中自組裝成水凝膠的方法

無效

• 申請號: 201310323509.5
• 申請日: 2013-07-29
• 公開（公告）號: CN103417976A
• 公開（公告）日: 2013-12-04
• 發明（設計）人: 朱利民;公曉;聶華麗;宋恒歡;魏然
• 申請（專利權）人: 東華大學
• 主分類號: A61K47/36
• 分類號: A61K47/36;A61K47/42;A61K47/18
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達

技術領域

本發明屬于二肽衍生物的自組裝領域，特別涉及一種二肽衍生物在殼聚糖溶液中自組裝成水凝膠的方法。

背景技術

水凝膠是一種通過物理或化學交聯形成的具有納米級三維貫穿網狀結構的材料，能夠吸水溶脹并且保持大量水分而不溶解，并且具有很好的生物相容性和水滲透性。水凝膠按材料來源分為天然類和合成類兩大類。能夠形成水凝膠的天然高分子材料包括：括多糖類如淀粉、纖維素、海藻酸、透明質酸，殼聚糖等，多肽類如膠原、聚L-賴氨酸、聚L-谷胺酸等。合成的親水高分子包括聚乙烯醇、丙烯酸及其衍生物類如聚丙烯酸、聚丙烯酰胺等。其中具有自組裝特性的多肽類分子，可以形成具有纖維網狀納米結構的水凝膠。這些材料因其良好的生物相容新和生物可降解性，在生物醫學領域呈現出特有的優勢，具有很廣闊的應用前景。

Fmoc-短肽是由Gazit研究小組首次發現的可以進行自組裝的一類新型肽類材料，包括Fmoc-FF，Fmoc-FG、Fmoc-RGD，其自組裝有pH調節法和溶解-稀釋法等，其中溶解-稀釋法是將Fmoc-FF等溶解在六氟異丙醇（HFIP）或者二甲基亞砜（DMSO）中然后注入水中稀釋，靜置后形成水凝膠。

由于二苯丙氨酸會形成氫鍵、β折疊結構以及苯環間的π-π相互作用，這些作用力使得二苯丙氨酸及其部分衍生物具有良好的自組裝性質，因此在水或有機溶劑中它能夠通過分子之間的氫鍵、范德華力、π-π相互作用、配位鍵等非共價鍵作用而自組裝形成三維貫穿網狀結構水凝膠。由于殼聚糖中含有豐富的羥基結構，其與Fmoc-FF相互結合后，應該會形成大量的氫鍵，有利于其結構的穩定。另外，由于該材料良好的可降解性、生物相容性等優點使其備受關注。自從被發現以來，不論是在醫學的載藥領域還是功能納米材料領域都引起了人們很大的研究興趣。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種二肽衍生物在殼聚糖溶液中自組裝成水凝膠的方法，該方法簡單，操作簡便，效果明顯；本發明所用的殼聚糖廉價易得，并且具有良好的生物相容性。

本發明的一種二肽衍生物在殼聚糖溶液中自組裝成水凝膠的方法，包括：

（1）用體積百分濃度為1%的乙酸溶液溶解殼聚糖，得到25-130mg/ml的殼聚糖溶液；

（2）將二肽衍生物九芴甲氧羰基-二苯丙氨酸Fmoc-FF加入二甲基亞砜中，溶解，得到Fmoc-FF溶液；其中Fmoc-FF與二甲基亞砜的配比為10-20mg：100-200μl；

（3）向殼聚糖溶液中滴加Fmoc-FF溶液，加完后充分震蕩，混勻，陳化，得到Fmoc-FF/殼聚糖復合水凝膠，其中殼聚糖溶液和Fmoc-FF溶液的體積比為1-2ml：20μl。

所述步驟（1）中殼聚糖溶液的濃度為20mg/ml，40mg/ml，60mg/ml，80mg/m，l00mg/ml。所述步驟（2）中所述二肽衍生物Fmoc-FF溶液的濃度為100mg/ml。

所述步驟（3）中震蕩為漩渦震蕩儀震蕩，震蕩時間為30～60s，轉速為2500rpm/min，震蕩時所使用的容器為EP管，EP管的量程是5mL。

所述步驟（3）中陳化為室溫條件下陳化2-3天。

向三蒸水中迅速加入九芴甲氧羰基-二苯丙氨酸Fmoc-FF溶液，加完后充分震蕩，混勻，得到Fmoc-FF水凝膠。

Fmoc-FF購于瑞士Bachem公司。

九芴甲氧羰基-二苯丙氨酸Fmoc-FF的分子結構式為：

二肽衍生物在不同的殼聚糖濃度中能夠形成不同穩定性能的水凝膠，通過殼聚糖含量的控制，調控Fmoc-FF水凝膠形成的快慢以及穩定性的好壞，研究多羥基類材料對二肽衍生物水凝膠自組裝情況的影響。以便根據需要制備出各種性能的復合水凝膠，應用于藥物傳遞、皮膚貼片治療以及組織修復等領域，因此本研究具有重要的科研意義與應用價值。

有益效果

（1）該發明方法簡單，操作簡便，效果明顯；

（2）本發明所使用殼聚糖廉價易得，并且具有良好的生物相容性，可以在載藥試驗、組織支架制備以及組織修復等方面進行后續研究，拓展其應用領域。

附圖說明

圖1為Fmoc-FF的分子結構式；

圖2為制備的新鮮的復合水凝膠的流變性時間掃描，其中a表示水凝膠的儲能模量，b表示體系粘度，c表示水凝膠的損耗模量；

圖3為復合水凝膠冷凍-干燥后的SEM圖；