[發明專利]編碼重組rhHER2-mAb人源化單克隆抗體的基因及其應用

有效

• 申請號: 201310323234.5
• 申請日: 2013-07-29
• 公開（公告）號: CN103361355A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發明（設計）人: 謝秋玲;熊盛;洪岸;黃亞東;陳志南;陳慧萍
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C12N15/13
• 分類號: C12N15/13;C12N15/85;C12N5/10;C12P21/08
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞;陳燕嫻

技術領域

本發明涉及一種編碼單克隆抗體的基因，特別涉及一種編碼重組rhHER2-mAb人源化單克隆抗體的基因及其應用。

背景技術

rhHER2-mAb是一種重組DNA衍生的人源化單克隆抗體，選擇性地作用于人表皮生長因子受體-2（HER2）的細胞外部位。此抗體屬IgGl型，含人的框架區，及能與HER-2結合的鼠抗-p185HER2抗體的互補決定區。

HER2原癌基因或C-erbB2編碼一個單一的受體樣跨膜蛋白，分子量185kDa，其結構上與表皮生長因子受體相關。在原發性乳腺癌患者中觀察到有25%～30%的患者HER2過度表達。HER2基因擴增的結果是這些腫瘤細胞表面HER2蛋白表達增加，導致HER2受體活化。研究表明，HER2過度表達的腫瘤患者較無過度表達的無病生存期短。HER2的過度表達可通過以下方法診斷：對腫瘤組織塊以免疫組化為基礎的評價法，組織或血漿樣品的ELISA法或熒光原位雜交法（FISH）。

抗HER2人源化單克隆抗體（rhHER2-mAb）又稱曲妥珠單抗（國際非專利藥品名稱：Trastuzumab），在中國的商品名為：赫賽汀（大陸及港澳地區）、賀癌平（臺灣地區），由瑞士羅氏Roche藥廠生產，是第一個針對HER2/neu基因擴增的人源化單克隆抗體，能夠特異性識別并作用于HER2的細胞外部位，使其通過吞噬作用離開細胞膜進入核體內，抑制其介導的信號轉導，從而達到治療腫瘤的作用。曲妥珠單抗在體外以及動物實驗中均顯示其可以抑制HER2過度表達的腫瘤細胞的增殖。另外，曲妥珠單抗還是抗體依賴的細胞介導的細胞毒反應（ADCC）的潛在介質。在體外研究中，已經證明了曲妥珠單抗介導的ADCC在HER2過度表達的癌細胞中比HER2非過度表達的癌細胞中優先產生。

Herceptin于1998年在美國批準上市，2002年在我國上市，在臨床試驗和后續應用中均取得了確切的療效。在化療輔助治療的年代，乳腺癌的治愈率僅為43.4%，靶向藥物赫賽汀的臨床應用，使早期HER2陽性的乳腺癌患者的治愈率提升到80%左右。但是，價格仍相對高昂，因此仍需獲得成本較低的生產方法。目前，人們發現，抗體的表達量與編碼基因的偏好性、表達方法有一定的相關性。

發明內容

本發明的首要目的在于克服現有技術的缺點與不足，提供一種編碼重組rhHER2-mAb人源化單克隆抗體的基因。

本發明的另一目的在于提供所述的編碼重組rhHER2-mAb人源化單克隆抗體基因的應用。

本發明的目的是通過下述技術方案實現：一種編碼重組rhHER2-mAb人源化單克隆抗體的基因，包含編碼輕鏈的核苷酸序列和編碼重鏈的核苷酸序列；編碼輕鏈的核苷酸序列如下所示：

GACATCCAGATGACGCAGTCGCCGTCCTCATTGAGCGCATCCGTGGGAGACAGAGT?CACTATTACATGCCGGGCATCCCAAGACGTAAACACGGCCGTCGCCTGGTACCAACAGA?AGCCCGGAAAAGCGCCCAAACTGTTGATCTACTCCGCCTCATTTCTGTACAGCGGGGTA?CCCTCGAGGTTCAGCGGCTCGAGGAGCGGGACGGATTTCACGTTGACAATTTCGTCACT?TCAGCCGGAAGATTTTGCGACATACTATTGCCAGCAACACTATACCACACCCCCGACGTT?TGGCCAGGGGACCAAAGTCGAGATCAAGCGGACCGTGGCCGCTCCGTCAGTATTCATCT?TCCCGCCGTCCGATGAGCAACTCAAGAGCGGAACCGCATCAGTCGTATGCTTGCTCAAT?AACTTCTATCCGCGAGAGGCGAAGGTGCAGTGGAAAGTGGACAACGCCCTGCAGTCCG?GTAATAGCCAGGAATCAGTCACGGAGCAGGATTCAAAGGATTCGACCTATTCCCTCTCGT?CGACATTGACGCTGTCGAAAGCAGACTACGAAAAACATAAAGTGTACGCTTGTGAAGT?GACACACCAGGGCCTTTCATCCCCGGTGACAAAGTCGTTCAATCGCGGGGAGTGT；

編碼重鏈的核苷酸序列如下所示：