[發明專利]棉花細胞質雄性不育恢復系的分子鑒定方法

有效

• 申請號: 201310322542.6
• 申請日: 2013-07-29
• 公開（公告）號: CN104342434B
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 吳建勇;邢朝柱;郭立平;戚廷香
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院棉花研究所
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司11002
• 代理人: 王朋飛

1.用于鑒定棉花細胞質雄性不育恢復系的分子標記，其特征在于，所述分子標記由核苷酸序列如SEQ ID NO.2和3所示的引物經PCR擴增棉花基因組DNA得到；且

所述分子標記含有一段特異的片段，該特異片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.權利要求1所述的分子標記在鑒定棉花細胞質雄性不育恢復系中的應用。

3.權利要求1所述的分子標記在鑒定棉花恢復系種子純度中的應用。

4.用于通過PCR擴增權利要求1所述分子標記，從而鑒定棉花細胞質雄性不育恢復系的CAPS標記引物，其特征在于，其為核苷酸序列如SEQ ID NO.2和3所示的引物。

5.權利要求4所述的引物在鑒定棉花細胞質雄性不育恢復系中的應用。

6.權利要求4所述的引物在鑒定棉花恢復系種子純度中的應用。

7.一種棉花細胞質雄性不育恢復系的分子鑒定方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)用權利要求4所述的引物擴增待測棉花樣品的基因組DNA，回收擴增產物；

(2)擴增產物經限制性內切酶Dra I酶切后，酶切產物經瓊脂糖凝膠電泳檢測，若電泳條帶出現184bp和124bp兩個特異性條帶，而沒有出現317bp的擴增片段的待測樣品為不含恢復基因位點的棉花材料；若電泳條帶出現317bp的同時，還出現184bp和124bp兩個特異性條帶，則待測樣品為恢復基因位點雜合的棉花材料；若電泳條帶僅有317bp條帶，沒有出現184bp和124bp這兩個特異性條帶，則待測樣品為恢復基因位點純合的棉花材料。

8.如權利要求7所述的方法，其特征在于，酶切時間為30min。