[發明專利]抗IL-1β人源化單克隆抗體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201310321348.6
• 申請日: 2013-07-29
• 公開（公告）號: CN104341501B
• 公開（公告）日: 2019-08-30
• 發明（設計）人: 閆樹德;吳辰冰
• 申請（專利權）人: 上海睿智化學研究有限公司
• 主分類號: C07K16/24
• 分類號: C07K16/24;C12N15/13;C12N15/70;C12N7/01;C12N15/85;C12N5/10;C12P21/02;A61K39/395
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦

1.一種分離的蛋白質，其特征在于，其是一種抗IL-1β單鏈抗體，其包括重鏈可變區和輕鏈可變區，所述重鏈可變區是在如序列表中SEQ?ID?No:1所示氨基酸序列的肽鏈的第57位和第60位氨基酸中的一位或兩位經過取代一個氨基酸所形成的肽鏈，和/或，所述輕鏈可變區是在如序列表中SEQ?ID?No:2所示氨基酸序列的肽鏈的第27位、28位和第29位氨基酸中的一位或多位經過取代一個氨基酸所形成的肽鏈。

2.如權利要求1所述的蛋白質，其特征在于，所述重鏈可變區為：將序列表中SEQ?ID?No:1所示氨基酸序列的肽鏈的第57位的絲氨酸突變為丙氨酸；所述氨基酸序列中第60位的苯丙氨酸突變為異亮氨酸；所述輕鏈可變區為：將序列表中SEQ?ID?No:2所示氨基酸序列的肽鏈的第27位的甘氨酸突變為絲氨酸或精氨酸；所述氨基酸序列中第28位的天冬酰胺突變為纈氨酸或蘇氨酸；所述氨基酸序列中第29位的異亮氨酸突變為纈氨酸。

3.一種分離的蛋白質，其特征在于，其是一種抗IL-1β全長IgG抗體，其包括重鏈可變區和輕鏈可變區，所述重鏈可變區是在如序列表中SEQ?ID?No:1所示氨基酸序列的肽鏈的第57位和第60位氨基酸中的一位或兩位經過取代一個氨基酸所形成的肽鏈，和/或，所述輕鏈可變區是在如序列表中SEQ?ID?No:2所示氨基酸序列的肽鏈的第27位、28位和第29位氨基酸中的一位或多位經過取代一個氨基酸所形成的肽鏈。

4.如權利要求3所述的蛋白質，其特征在于，所述重鏈可變區為：將序列表中SEQ?ID?No:1所示氨基酸序列的肽鏈的第57位的絲氨酸突變為丙氨酸；所述氨基酸序列中第60位的苯丙氨酸突變為異亮氨酸；所述輕鏈可變區為：將序列表中SEQ?ID?No:2所示氨基酸序列的肽鏈的第27位的甘氨酸突變為絲氨酸或精氨酸；所述氨基酸序列中第28位的天冬酰胺突變為纈氨酸或蘇氨酸；所述氨基酸序列中第29位的異亮氨酸突變為纈氨酸。

5.一種分離的蛋白質，其特征在于，其是一種抗IL-1βFab抗體，其包括重鏈可變區和輕鏈可變區，所述重鏈可變區是在如序列表中SEQ?ID?No:1所示氨基酸序列的肽鏈的第57位和第60位氨基酸中的一位或兩位經過取代一個氨基酸所形成的肽鏈，和/或，所述輕鏈可變區是在如序列表中SEQ?ID?No:2所示氨基酸序列的肽鏈的第27位、28位和第29位氨基酸中的一位或多位經過取代一個氨基酸所形成的肽鏈；較佳地，在所述蛋白質中，所述重鏈可變區為：將序列表中SEQ?ID?No:1所示氨基酸序列的肽鏈的第57位的絲氨酸突變為丙氨酸；所述氨基酸序列中第60位的苯丙氨酸突變為異亮氨酸；所述輕鏈可變區為：將序列表中SEQ?ID?No:2所示氨基酸序列的肽鏈的第27位的甘氨酸突變為絲氨酸或精氨酸；所述氨基酸序列中第28位的天冬酰胺突變為纈氨酸或蘇氨酸；所述氨基酸序列中第29位的異亮氨酸突變為纈氨酸。

6.一種分離的核酸，其特征在于，所述核酸是編碼如權利要求1～5任一項所述蛋白質的核酸分子。

7.一種包含如權利要求6所述核酸的重組表達載體。

8.一種包含如權利要求7所述重組表達載體的重組表達轉化體。

9.一種重組抗IL-1β抗體的制備方法，其包括如下步驟：培養如權利要求8所述的重組表達轉化體，從培養物中獲得重組抗IL-1β抗體。

10.如權利要求9所述的重組抗IL-1β抗體在制備基因工程類藥物中的應用。