[發明專利]一種植物源殺螨劑的制備與應用

在審

• 申請號: 201310320566.8
• 申請日: 2013-07-29
• 公開（公告）號: CN104341285A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 胡延春;廖飛;何潔;譚輝;武雷;羅彪;羅麗娟
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C07C49/653
• 分類號: C07C49/653;C07C45/78;A61K31/122;A61P33/14
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技術領域

本發明涉及一種高效、低毒、環保型殺螨的植物提取物，尤其是涉及一種用于殺滅動物螨蟲的植物毒素的制備與應用。

背景技術

動物螨病是螨蟲寄生動物體表而引起的一種動物慢性體外寄生蟲病，其病原為疥螨、癢螨，主要發生于秋末、冬季和初春，通過患病動物與健康動物直接或間接接觸傳染，廣泛傳播于牛、羊、馬、犬、免、雞等動物。還可感染人類，在牧區、農牧區和規模化養殖場感染率和發病率均較高。動物發生該病主要表現為食欲降低或廢絕、消瘦、被毛脫落等，影響動物的生產性能和經濟價值，嚴重制約畜牧業健康發展和經濟效益。目前，用于治療動物螨病的藥物主要為化學合成和抗生素類藥物，如伊維菌素、阿維菌素、林丹乳油和螨凈等，此類藥物在有效防治動物螨病的同時，由于藥物殘留和草地污染，引起了公共衛生、食品安全和生態環境等問題。從天然產物中尋找、篩選防治動物螨病的藥物已成為人們廣泛關注的研究熱點。

發明內容

本發明為了對外來入侵植物紫莖澤蘭的開發利用提供新的思路，從紫莖澤蘭葉片中分離純化一種單體化合物Euptox?A，其對家兔等動物的癢螨和疥螨均具有良好殺滅作用，且效果優于臨床常用殺螨藥物伊維菌素，有潛力作為一種高效、低毒、環保型的殺螨新藥。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案為：

一種用于殺螨的植物提取物，其特殊之處在于：所述植物提取物為紫莖澤蘭甲醇提取物。

上述紫莖澤蘭甲醇提取物為乙酸乙酯部位提取物。

上述紫莖澤蘭提取物的殺螨活性成分為Euptox?A。

Euptox?A的制備：紫莖澤蘭葉粉100?g，甲醇超聲提取2-3次，每次60?min，合并濾液；濾液在40℃下減壓蒸干得到浸膏；用20%的甲醇溶解浸膏，并用等量乙酸乙酯萃取2-3次，合并乙酸乙酯部分在40℃下減壓蒸干得到浸膏；硅膠拌樣，干法上樣，進行硅膠柱層析，先用二氯甲烷洗脫除去低極性雜質，繼續用二氯甲烷：乙酸乙酯（98：2,v/v）洗脫，收集洗脫液，減壓蒸干，浸膏溶于甲醇：水：三氯甲烷（85：10：5，v/v/v）溶劑中，上XAD-2大孔樹脂柱洗脫，以除去色素等雜質，減壓除去洗脫劑，殘渣樣品進行反復硅膠柱層析得到Euptox?A純品。

Euptox?A的殺螨活性試驗：用吐溫-80等組溶劑溶解，制成含Euptox?A為不同濃度的藥液。將劑量0.5、1、2、3和4?mg/mL的Euptox?A藥液加入24孔板中，用濾紙吸取多余液體。用挑蟲針將10只螨蟲依次挑人各孔中，以吐溫-80為空白對照，伊維菌素為陽性對照。每一濃度設5個重復。然后將24孔板放入測試環境(25℃，相對濕度75%)培養，每隔1h用顯微鏡觀察一次，觀察4?h，記錄每個時段的死亡情況。當蟲體肢節長時間不動或用針刺激無反應時判定為死亡。

與現有技術相比，本發明的有益效果如下：

1、高效性：我們試驗中發現3、4?mg/mL濃度的Euptox?A?在4?h內體外可殺死全部供試疥螨，同樣在4?h內4?mg/mL濃度的Euptox?A可殺死全部供試癢螨。Euptox?A的這種高效性，比現有伊維菌素等大環內酷類抗生素好，目前已有系統研究和臨床普遍使用的其它中藥及其相關制劑，很少有能達到這種效果的。

2、低毒環保：Euptox?A來源于外來入侵植物，家畜對該植物有絕食性，相對還是較安全，且多數天然植物成分在自然環境中可自行降解，不致于在動物產品中長期殘留或通過食物鏈富集。Euptox?A作為從這些植物中得到的活性天然成分，同樣具有低毒、安全和環保的特點。

3、變廢為寶：紫莖澤蘭已成為我國外來入侵物種之首，但目前對紫莖澤蘭還沒有有效的防治措施，且紫莖澤蘭生物儲量巨大，所需成本昂貴。本發明從紫莖澤蘭葉片中分離得到一種具有高效殺螨活性的成分Euptox?A，為紫莖澤蘭的開發利用提供新的思路和基礎，可達到變廢為寶的目的。

Euptox?A在各種動物的多種螨病的治療方面展現出廣闊的開發利用前景。

具體實施方式

1材料與方法

1.1試驗藥品及材料

1.1.1供試藥材

????紫莖澤蘭，2012年7月采集于四川省涼山州，葉子陰干，粉碎備用。

1.1.2供試螨蟲