[發(fā)明專利]一種大豆中多種農(nóng)藥殘留的通用快速檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310320255.1
• 申請日: 2013-07-26
• 公開（公告）號(hào): CN103529153A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 樊苑牧;陳樹兵;賀小雨
• 申請（專利權(quán)）人: 寧波檢驗(yàn)檢疫科學(xué)技術(shù)研究院
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33226
• 代理人: 程曉明

1.一種大豆中多種農(nóng)藥殘留的通用快速檢測方法，其特征在于具體包括以下步驟：

（1）樣品前處理

A.提取

將大豆樣品充分打碎混合均勻作為試樣，稱取5.00g試樣于50mL離心管中，在離心管中加入9mL水，渦旋振蕩浸濕后，靜置10min，在離心管中加入20mL乙腈，用高速組織搗碎儀在15000r/min下勻漿提取1min，然后在離心管中加入1g氯化鈉、1g檸檬酸三鈉二水合物、0.5g檸檬酸氫二鈉鹽1.5水合物、4g無水硫酸鎂后振蕩1min，在4000rpm離心6min后取樣品上清液備用；

B.凈化

用5mL乙腈活化C₁₈固相萃取柱后，取10mL樣品上清液過C₁₈固相萃取柱，萃取液接收于雞心瓶中，用3mL乙腈洗脫C₁₈固相萃取柱，將洗脫液合并于雞心瓶中，將雞心瓶置于40℃水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮得到0.5-1.5mL濃縮液，在Carbon/NH₂固相萃取柱中加入0.5-1.5cm高的無水硫酸鈉，用10mL乙腈/甲苯混合液活化Carbon/NH₂固相萃取柱后，將濃縮液過Carbon/NH₂固相萃取柱，并用25mL乙腈/甲苯混合液洗脫，收集于雞心瓶中，將雞心瓶于40℃水浴中減壓蒸發(fā)至近干后用氮?dú)獯蹈桑?mL丙酮/正己烷混合液溶解定容至1mL得到樣品提取液備用；

（2）混合標(biāo)準(zhǔn)溶液組成和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

A．混合標(biāo)準(zhǔn)溶液組成：混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中306種農(nóng)藥的濃度均為1.0μg/ml，具體農(nóng)藥見表1所示；

B．基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量：吸取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液于5mL容量瓶，用按體積比1：1混合而成的丙酮/正己烷混合液定容至刻度，配制成各農(nóng)藥濃度均為20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL，200ng/mL的四種混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，取空白大豆樣品按步驟（1）處理，在吹干待定容的空白大豆樣品提取物中分別加入上述各濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液1mL，配制成濃度相應(yīng)為20ng/mL，50ng/mL，100ng/mL和200ng/mL的樣品基質(zhì)添加混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，以濃度為橫坐標(biāo)，儀器響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，做基質(zhì)加標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線，作為試樣處理液中待測物濃度定量的依據(jù)；

（3）氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用測定

色譜柱：HP-5MS，30m×0.25mm,0.25μm；

色譜柱溫度程序：50℃保持1min，以20℃/min升溫至150℃，再以3℃/min升溫至230℃，再以10℃/min升溫至300℃，保持10min；

載氣：高純氦氣，純度大于99.999%，流速1.2mL/min；

進(jìn)樣口溫度：250℃；

進(jìn)樣量：1μL；

進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；

電子轟擊源：EI；

離子源溫度：280℃；

質(zhì)譜接口溫度：250℃；

檢測模式：多反應(yīng)監(jiān)測，每種化合物分別選擇2個(gè)母離子，2個(gè)子離子，每種化合物監(jiān)測離子對及掃描時(shí)間見表1所示；

表1

；

（4）濃度計(jì)算方法

樣品中待測物的含量根據(jù)如下計(jì)算公式（1）得到：

????（式1）

式中：

C—試樣處理液中待測物濃度，根據(jù)基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到，單位為μg/mL；

V1—步驟（2）中樣品上清液分取量；

V2—步驟（1）中提取溶液（乙腈）量；

V3—定容體積，單位為毫升（mL）；

W—樣品稱樣量，單位為克（g）。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大豆中多種農(nóng)藥殘留的通用快速檢測方法，其特征在于：步驟（1）中所述的乙腈/甲苯混合液由乙腈和甲苯按體積比3:1的比例混合而成；所述的丙酮/正己烷混合液由丙酮和正己烷按體積比1:1的比例混合而成。