[發明專利]用于制備聚(5-羥基戊酸)和5碳化合物的綠色工藝和組合物

無效

• 申請號: 201310318119.9
• 申請日: 2009-12-14
• 公開（公告）號: CN103396978A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: W·R·法莫爾;J·比克邁耶;陸晨峰;常東云;F·斯科拉里;T·M·拉姆塞耶爾
• 申請（專利權）人: 麥特波力克斯公司
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12P7/62;C12P7/44;C12P7/18;C12R1/19
• 代理公司: 上海市華誠律師事務所 31210
• 代理人: 傅強國;賈師英

1.一種重組生物體，其經遺傳工程改造成將5-戊二酸半醛轉變成5碳單體、其聚合物或共聚物，其中所述重組生物體表達至少一種或一種以上編碼一種或一種以上選自由以下各物組成的群組的酶的基因：賴氨酸2-單加氧酶，EC1.13.12.2；5-氨基戊酰胺酶(δ-氨基戊酰胺酶)，EC3.5.1.30；5-氨基戊酸轉氨酶(δ-氨基戊酸轉氨酶)，EC2.6.1.48；賴氨酸脫羧酶，EC4.1.1.18；琥珀酸半醛還原酶(又稱為戊二酸半醛還原酶)，EC1.1.1.61；輔酶A轉移酶，EC2.8.3.14和EC2.8.3.n；酰基輔酶A合成酶，EC6.2.1.3；PHA合成酶，EC2.3.1.n；β-酮酰基輔酶A硫解酶，EC2.3.1.9；乙酰乙酰基輔酶A還原酶，EC1.1.1.36；戊二酸-半醛脫氫酶，EC1.2.1.20；丙醛脫氫酶，EC1.2.1.3；醇脫氫酶，EC1.1.1.1；1，3-丙二醇脫氫酶，EC1.1.1.202，且其中與未經修飾的生物體相比較，所述重組生物體產生較多的5-戊二酸半醛，且其中5-戊二酸半醛經所述重組生物體轉變成所述5碳單體、其聚合物或共聚物。

2.根據權利要求1所述的重組生物體，其中所述5碳單體選自由戊二酸、1，5戊二醇和5-羥基戊酸組成的群組。

3.根據權利要求1至2中任一權利要求所述的重組生物體，其中所述聚合物或共聚物包含聚羥基烷酸。

4.根據任一前述權利要求所述的重組生物體，其中所述單體包含5-羥基戊酸。

5.根據任一前述權利要求所述的重組生物體，其中所述重組生物體將5-氨基戊酸轉變成戊二酸半醛。

6.根據任一前述權利要求所述的重組生物體，其中所述重組生物體將賴氨酸轉變成5-氨基戊酸。

7.根據任一前述權利要求所述的重組生物體，其中用于構建所述重組生物體的生物體經過修飾以相對于未經修飾的生物體過量產生賴氨酸。

8.根據任一前述權利要求所述的重組生物體，其中所述重組生物體對有毒賴氨酸類似物S-(2-氨基乙基)半胱氨酸具有抗性，

所述重組生物體表達賴氨酸反饋抗性二氫吡啶二羧酸合成酶，

所述重組生物體表達賴氨酸反饋抗性天冬氨酸激酶III，并且/或者

所述重組生物體經進一步工程改造以抑制或阻斷賴氨酸輸出。

9.根據任一前述權利要求所述的重組生物體，其中所述重組生物體表達或過量表達戊二酸半醛脫氫酶且所述5碳單體是戊二酸。

10.根據權利要求9所述的重組生物體，其中所述戊二酸半醛脫氫酶是由選自由davD、yneI和gabD組成的群組的基因編碼。

11.根據權利要求1至8中任一權利要求所述的重組生物體，其中所述重組生物體將戊二酸釋放到細胞外環境中。

12.根據權利要求1至8中任一權利要求所述的重組生物體，其中所述生物體經過修飾以降低或消除戊二酸半醛脫氫酶活性，且所述5碳單體不是戊二酸。

13.根據權利要求12所述的重組生物體，其中所述戊二酸半醛脫氫酶是通過缺失或破壞一個或一個以上選自由davD、yneI和gabD或其同系物組成的群組的基因來減少或消除。

14.根據權利要求1至8和12至13中任一權利要求所述的重組生物體，其中所述重組生物體將5-羥基戊酸釋放到所述細胞外環境中。

15.根據權利要求12至13中任一權利要求所述的重組生物體，其中所述重組生物體在所述細胞外環境中釋放5-羥基戊酸，且所述5-羥基戊酸與δ-戊內酯相平衡。

16.根據權利要求1至8和12至13中任一權利要求所述的重組生物體，其中所述重組生物體將5-羥基戊酸轉變成5-羥基戊酸輔酶A或1，5-戊二醇，并且/或者

將5-羥基戊酸輔酶A轉變成聚羥基烷酸。

17.根據權利要求1至8和12至13中任一權利要求所述的重組生物體，其中所述重組生物體將5-羥基戊酸轉變成聚(5-羥基戊酸)或其共聚物。

18.根據權利要求17所述的重組生物體，其中所述共聚物選自由聚(3-羥基丙酸-共-5HV)、聚(3-羥基丁酸-共-5HV)和聚(4-羥基丁酸-共-5HV)組成的群組。