[發明專利]快速鑒定煙草炭疽病抗性的方法有效
| 申請號： | 201310317628.X | 申請日： | 2013-07-25 |
| 公開（公告）號： | CN103399143A | 公開（公告）日： | 2013-11-20 |
| 發明（設計）人： | 王靜;孔凡玉;張成省;田華;馮超 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院煙草研究所 |
| 主分類號： | G01N33/50 | 分類號： | G01N33/50 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129 | 代理人： | 吳泳歷 |
| 地址： | 266101 山東*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 快速 鑒定 煙草 炭疽病 抗性 方法 | ||
【權利要求書】：
1.快速鑒定煙草炭疽病抗性的方法，其步驟如下：
（1）富集煙草炭疽病菌(Colletotrichum?destructivum)分泌的無菌體毒素液；
（2）準備培養皿：培養皿底部鋪濾紙，在濾紙上加無菌體毒素液使濾紙充分浸濕；
（3）在供試品種的葉片上取形狀規則的小葉片，并將所述小葉片分散于無菌體毒素液浸濕的濾紙上，在所述小葉片上再覆蓋一層被毒素浸濕的濾紙；
（4）蓋好培養皿后置于18℃～35條件下培養2天；
（5）統計小葉片上病斑擴展寬度確定供試品種的抗病性強弱。
2.根據權利要求1所述的方法，富集所述無菌體毒素液的步驟如下：
將煙草炭疽病菌菌株移至馬鈴薯葡糖糖固體培養基上培養5～10天，用打孔器在菌落邊緣打取菌餅，挑取3個菌餅放置于裝有馬鈴薯葡糖糖液體培養基的三角瓶中，于黑暗下、26℃、以120r/min恒溫振蕩培養15天；
將培養液于10000r/min離心15min，上清液經0.22μm微孔濾膜過濾后的濾液為所述無菌體毒素液，4℃保存備用。
3.根據權利要求1所述的方法，所述形狀規則的小葉片指采用打孔直徑為15mm的打孔器打取的葉圓片。
4.根據權利要求3所述的方法，每個培養皿中放置8-10個所述葉圓片。
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