[發明專利]液相-串聯質譜同時檢測9種端基炔類激素的方法

有效

• 申請號: 201310315109.X
• 申請日: 2013-07-25
• 公開（公告）號: CN103389351A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發明（設計）人: 郭賓;朱衛桃;曾樂;葉美玲;湯領;陳波
• 申請（專利權）人: 郭賓
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N27/62
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種液相-串聯質譜同時檢測多種端基炔類激素的方法，包括：通過點擊反應使待測樣品在電噴霧電離下能帶上電荷，從而能檢測到衍生好的待測物；其中所述點擊反應包括以下具體步驟：

1)、生物基質血清中點擊反應前處理步驟

于2mL?pp管中按順序加入下列反應物：純水或血清，混標，DMSO、內標炔諾酮-d6、H₂O、(s)-2-疊氮-3-甲基丁酸·環己銨鹽、CuSO₄溶液、NaAsc溶液，渦旋1min后，放入37℃恒溫振蕩儀中反應4h，取出后加入EtOAc，渦旋1min，然后離心，取上層清液，置于氮吹儀中吹干，用CH₃OH復溶，進樣，其中每個反應平行做兩個樣；或

2)、生物基質尿液中點擊反應前處理步驟

于2mL?pp管中按順序加入下列反應物：純水或尿液，混標，DMSO、內標炔諾酮-d6、H₂O、(s)-2-疊氮-3-甲基丁酸·環己銨鹽、CuSO₄溶液、NaAsc溶液，渦旋1min后，放入37℃恒溫振蕩儀中反應4h，取出后加入EtOAc，渦旋1min，然后離心，取上層清液，置于氮吹儀中吹干，用CH₃OH復溶，進樣，其中每個反應平行做兩個樣。

2.如權利要求1所述的方法，其中個，步驟1)中每200μL純水或血清加入混標50μL、MMSO150μL、50ng/mL的內標炔諾酮-d610μL、H₂O50μL、500μg/mL(s)-2-疊氮-3-甲基丁酸·環己銨鹽20μL、20mM?CuSO₄溶液10μL和5mM?NaAsc溶液10μL，反應后加入的所述EtOAc為1ml，用100μL?CH₃OH復溶。

3.如權利要求1所述的方法，其中，所述混標為變量。

4.如權利要求1所述的方法，其中，步驟1)中，所述離心的具體條件是：10000g，5min。

5.如權利要求1所述的方法，其中個，步驟2)中每200μL純水或血清加入混標50μL、MMSO150μL、50ng/mL的內標炔諾酮-d610μL、H₂O50μL、500μg/mL(s)-2-疊氮-3-甲基丁酸·環己銨鹽20μL、CuSO₄溶液10μL和NaAsc溶液10μL，反應后加入的所述EtOAc為1ml，用100μL?CH₃OH復溶，CuSO₄溶液為25mM，NaAsc溶液為40mM。