[發(fā)明專(zhuān)利]一種金邊胡頹子的組織培養(yǎng)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310313011.0
• 申請(qǐng)日: 2013-07-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103733987A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-04-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 史清云;史云光;朱艷;王海珍;張榮良;蔡亞萍
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江蘇綠苑園林建設(shè)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 南京蘇高專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 張堅(jiān)剛

?

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于設(shè)計(jì)一種植物組織培養(yǎng)方法，具體為金邊胡頹子的組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

金邊胡頹子屬于胡頹子科胡頹子屬，常綠灌木，樹(shù)冠圓形開(kāi)展。葉橢圓形，革質(zhì)有光澤，深綠色邊緣有一圈金邊。秋天開(kāi)花，花乳白色，1-2cm，花期3－4月，果期10－11月。喜濕潤(rùn)和光照，也耐陰。常用扦插方法進(jìn)行繁殖，在6月霉雨季進(jìn)行，剪取當(dāng)年生長(zhǎng)半木質(zhì)化枝條作插條，長(zhǎng)10－15厘米，上部留3－4片葉，插后1個(gè)月生根。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：針對(duì)上述現(xiàn)有存在的問(wèn)題和不足，本發(fā)明的目的是提供了一種金邊胡頹子的組織培養(yǎng)方法，該方法避免季節(jié)性的限制，加快金邊胡頹子的繁殖速度，解決扦插成活率低的問(wèn)題。

技術(shù)方案：為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：一種金邊胡頹子的組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟：

步驟1：外植體的選擇及消毒，選取成年金邊胡頹子頂部剪取著生葉芽的一年生枝條，采下的枝條進(jìn)行水插，置于生長(zhǎng)室中，促使葉芽萌發(fā)為嫩梢，在嫩梢長(zhǎng)2～4厘米時(shí)切下作外植體，或者在4～5月份在同株樹(shù)上取相同長(zhǎng)的當(dāng)年嫩梢直接作外植體；采下枝條后，先用70％酒精泡30秒，接著在5％的次氯酸鈣溶液中泡5分鐘，無(wú)菌水沖洗3-4次，然后將其切成長(zhǎng)5毫米的節(jié)段，作為初代外植體；

步驟2：接種培養(yǎng)?

a、初代培養(yǎng)，將所備外植體接種在MS?+?KT0.5mg∕L+ZT1.0mg∕L+NAA0.2mg∕L+蔗糖30g/L?+瓊脂6g/L，PH為5.5～5.6的培養(yǎng)基上，在溫度25±2℃室溫下，光照強(qiáng)度2500lux左右的條件下，培養(yǎng)25-30天左右時(shí)，增殖芽長(zhǎng)到2-3cm；

b、?繼代培養(yǎng)，?把切下叢生芽接種在MS?+?BA1.5mg∕L+ZT1mg∕L+NAA0.3mg∕L+蔗糖30g/L?+瓊脂6g/L，PH為5.5～5.6的培養(yǎng)基上，在溫度25±2℃，，每日光照14小時(shí)，至28天左右，小芽基部形成愈傷組織，并形成叢生芽，叢生小芽達(dá)到1-2cm；（一般第一次繼代培養(yǎng)時(shí)增殖率2倍左右，經(jīng)2～3次繼代培養(yǎng)后增殖倍數(shù)可達(dá)到4倍左右）。

c、?生根培養(yǎng)，當(dāng)增殖芽長(zhǎng)至2～3㎝時(shí)，將增殖芽的基部在1克/升的含IBA溶液中浸泡15分鐘，轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)：生根培養(yǎng)基為大量元素減半的MS培養(yǎng)基，并且培養(yǎng)基中不含生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)（植物激素及人工和成的激素類(lèi)似物），再加少量的活性碳，接種后將其黑暗條處理12天，溫度控制在25～28℃；暗處理后在光照強(qiáng)度為1200lux，每日光照14小時(shí)條件下培養(yǎng)；經(jīng)25天，當(dāng)可見(jiàn)白色短根形成，即可進(jìn)行煉苗及移栽。

作為優(yōu)選，步驟2中所述生根培養(yǎng)的生根培養(yǎng)基為1∕2MS+活性碳1.0g∕L+蔗糖20g∕L。

作為優(yōu)選，步驟所述煉苗及移栽的具體方法為：當(dāng)試管苗長(zhǎng)出根但尚未老化前，打開(kāi)瓶蓋放在陽(yáng)光充足處讓其鍛煉1～2天，然后取出幼苗用溫水將瓊脂洗掉，移栽到消毒過(guò)的基質(zhì)中。移栽時(shí)要注意不要傷根并使其處于伸展?fàn)顟B(tài)，澆透水后，用塑料薄膜覆蓋，保持空氣的相對(duì)濕度在90％以上，溫度在25℃±5℃，過(guò)一星期后逐步通氣并澆灌適量的水。

有益效果：與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明通過(guò)采用組織培養(yǎng)的方法，避免季節(jié)性的限制，加快金邊胡頹子的繁殖速度，解決扦插成活率低的問(wèn)題。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡明本發(fā)明，應(yīng)理解這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，在閱讀了本發(fā)明之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明的各種等價(jià)形式的修改均落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求所限定的范圍。

實(shí)施例1

一．外植體的選擇及消毒

選取成年金邊胡頹子頂部剪取著生葉芽的一年生枝條，采下的枝條進(jìn)行水插，置于生長(zhǎng)室中生長(zhǎng)，在嫩梢長(zhǎng)4厘米時(shí)切下作外植體。采下枝條后，先用70％酒精泡30秒，接著在5％的次氯酸鈣溶液中泡5分鐘，無(wú)菌水沖洗3次，然后將其切成長(zhǎng)5毫米的節(jié)段，作為初代外植體。

二．接種培養(yǎng)?

1．初代培養(yǎng)?

將所備外植體接種在MS?+?KT0.5mg∕L+ZT1.0mg∕L+NAA0.2mg∕L+蔗糖30g/L?+瓊脂6g/L，PH為5.5的培養(yǎng)基上，在溫度25±2℃室溫下，光照強(qiáng)度2500lux左右的條件下，培養(yǎng)30天左右時(shí)，芽長(zhǎng)到2-3cm。

2.?繼代培養(yǎng)?