[發明專利]從油橄欖葉中提取橄欖苦甙的方法

有效

• 申請號: 201310312833.7
• 申請日: 2013-07-24
• 公開（公告）號: CN103333213A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 蔣元勇;文繼承;雍小軍;朱仰輝;易華
• 申請（專利權）人: 桂林茗興生物科技有限公司
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標事務所有限公司 45107
• 代理人: 石曉玲

技術領域

本發明涉及植物活性成分的提取方法，具體涉及從油橄欖葉中提取橄欖苦甙的方法。

背景技術

油橄欖葉為木犀科木犀欖屬油橄欖（Olea?europae?L.）的葉子，油橄欖葉中含有大量的生物活性物質，如裂環烯醚萜類、黃酮及其苷、雙黃酮及其苷、低分子單寧等，其中以裂環烯醚萜類為主要活性物質。裂環烯醚萜類是一類苦澀物質，其活性最高的成分為橄欖苦甙（Oleuropein）。

橄欖苦甙是一種雙分子結構酚類和黃酮類物質，具有天然的抗氧化、抗腫瘤、延緩衰老、增強心血管功能、治療慢性前列腺炎、增強免疫力、調節內分泌系統、護肝、抗炎等重要的保健功能，同時還有降血脂、降血糖的藥理作用，廣泛應用于食品、化妝和生物制藥等領域。橄欖苦甙具有強力的抗細菌和抗病毒特性，可用于制造治療病毒、細菌、原生動物類、寄生蟲和吸血蟲等所引起的疾病和治療感冒的藥物。橄欖苦甙還可以保護皮膚細胞不受紫外線的傷害，防止紫外線對皮膚膜脂質的分解，促進纖維細胞生成膠原蛋白，減少纖維細胞膠原酶的分泌，組織細胞膜的抗聚糖反應，從而高度保護纖維細胞，自然抵御因氧化而導致的肌膚破壞，更免受UV紫外線傷害，有效維持肌膚柔嫩與彈性，達到護膚、嫩膚的功效。

目前公開的橄欖苦甙的提取分離技術較多，一般采用醇提或堿提法提取橄欖葉中的有效成分，然后進行上柱層析等一系列分離純化步驟，得到高純度的橄欖苦甙。如公開號為CN102702287A的發明專利《從橄欖葉中提取純化橄欖苦甙的方法》，該方法用pH值為8～10的堿液對橄欖葉進行常溫浸提，將所得提取液經分子篩型大孔吸附樹脂柱層析，然后用體積濃度為50～80%的乙醇洗柱，收集含目標成分的洗脫液，濃縮干燥，得到低含量的橄欖苦甙；再將低含量的橄欖苦甙用極性值為3.8～4.2的極性溶液溶解，抽濾，濾液濃縮，得到濃縮液；再向濃縮液中加入有機溶劑調節極性，低溫條件下放置析出晶體，干燥，得到高純度的橄欖苦甙。堿液提取時堿會使橄欖苦甙水解成羥基洛醇鹽，提取時間越久，水解程度越高，最終產品的收率較低，僅為4%左右。當采用乙醇作為溶媒會將植物中的色素、黃酮類、萜類等物質提取出來，提取液中雜質較多，需要濃縮、離心沉淀之后才能上柱，會增加能耗，提高生產成本，不利于大規模工業化生產。同時，乙醇不易讓橄欖苦甙在植物中與其他成分相結合的鍵完全斷開，橄欖苦甙的提取率不高，產品的收率一般在2～3%之間。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種從油橄欖葉中提取橄欖苦甙的方法，以該方法制得的橄欖苦甙收率高，純度大。

本發明提供的技術方案是從油橄欖葉中提取橄欖苦甙的方法，包括以下步驟：

1）取油橄欖葉粉碎，加水煎煮2～3次，每次煎煮至沸騰后維持微沸2～3h，合并煎煮液，過濾，得到濾液；

2）將濾液上大孔吸附樹脂柱層析，先用不超過1BV的水洗柱，再用體積濃度為60～70%的乙醇洗柱，收集乙醇洗脫液；

3）向乙醇洗脫液中加入其重量1～1.5‰的活性炭，加熱回流脫色20～30min，過濾，將濾液濃縮為15～18波美度的浸膏；

4）向浸膏中加入其3～4倍重量的乙醇，攪拌溶解，然后將溶液濃縮至原體積的1/3～1/2，趁熱加入有機溶劑調節極性至4.0～4.1，攪拌，靜置冷卻，析出晶體，干燥，即為橄欖苦甙。

上述方法中：

步驟1）中，油橄欖葉粉碎至10～30目；水的加入量為油橄欖葉重量的6～8倍。

步驟2）中，所述大孔吸附樹脂的型號為HPD-100+。HPD-100+型大孔樹脂是申請人根據生產實際需求，在原HPD-100型樹脂的基礎上調整了平均孔徑和比表面積兩項技術指標參數得到的，HPD-100+型樹脂對橄欖苦甙的吸附及解吸附效果更佳。申請人發現，將HPD-100+型樹脂層析后的乙醇洗脫液濃縮干燥，即為粗橄欖苦甙，檢測其純度為50～55%、收率可到14～15%。

HPD-100+型樹脂是苯乙烯型非極性共聚體，其技術指標參數如下：

1、產品名稱：大孔吸附樹脂

2、外觀：乳白色不透明球狀顆粒

3、粒徑范圍：（60～16目）0.3～1.25mm≥90%

4、含水量：65～75%

5、比表面積：710-750㎡/g；

6、堆積密度：0.65-0.75g/ml(濕態)

7、濕視密度：0.68-0.7g/ml

8、濕真密度：1.03-1.07g/ml

9、平均孔徑：