[發明專利]一種與小麥千粒重相關的分子標記及其應用

有效

• 申請號: 201310311234.3
• 申請日: 2013-07-23
• 公開（公告）號: CN104342484A
• 公開（公告）日: 2015-02-11
• 發明（設計）人: 景蕊蓮;岳愛琴;李昂;毛新國;昌小平
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院作物科學研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種利用小麥多態性位點鑒定或輔助鑒定小麥基因型的方法，所述多態性位點為X和Y兩個單核苷酸多態性位點，所述X和Y兩個單核苷酸多態性位點分別對應于小麥基因組DNA中序列表序列1自5’末端第1371位和第2450位；

所述X和Y兩個單核苷酸多態性位點依次為下述Ⅰ）、Ⅱ）和Ⅲ）的情況時相對應的基因型為A、B和C：

Ⅰ）G/G和G/G；

Ⅱ）G/G和A/A；

Ⅲ）A/A和G/G。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述獲得基因型A、B和C的方法包括對待測小麥的基因組DNA中任意一段包括所述2個單核苷酸多態性位點X和Y在內的DNA片段進行PCR擴增，并將該PCR擴增產物進行酶切鑒定的步驟。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增的靶序列為序列表序列1自5’末端第1—2663bp。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增使用的特異性引物對為序列表序列2所示的單鏈DNA和序列表序列3所示的單鏈DNA。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述酶切鑒定包括如下步驟：將PCR產物分別用MboII和BsgI酶切，獲得酶切產物M和酶切產物B；

若所述酶切產物M為762bp、681bp、465bp、375bp、225bp和155bp的DNA片段，則所述待測小麥在所述X位點為G/G；

若所述酶切產物M為1137bp、681bp、465bp、225bp和155bp的DNA片段，則所述待測小麥在所述X位點為A/A；

若所述酶切產物B為1955bp、510bp和198bp的DNA片段，則所述待測小麥在所述Y位點為G/G；

若所述酶切產物B為1955bp和708bp的DNA片段，則將所述待測小麥候選為在所述Y位點為A/A。

6.權利要求1—5中任一所述方法在鑒定或輔助鑒定小麥千粒重性狀中的應用。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于：

被確定為基因型為C的待測小麥，其千粒重高于被確定為基因型為A和B的待測小麥；被確定為基因型為A的待測小麥，其千粒重高于被確定為基因型為B的待測小麥。

8.擴增如下DNA片段的PCR引物對：小麥基因組DNA上的任意一段包括所述X和Y兩個單核苷酸多態性位點在內的DNA片段。

9.根據權利要求8所述的PCR引物對，其特征在于：所述PCR引物對為序列表序列2所示的單鏈DNA和序列表序列3所示的單鏈DNA。

10.一種鑒別或輔助鑒別小麥千粒重性狀的試劑或試劑盒，其特征在于：所述試劑或試劑盒包括序列表序列2所示的單鏈DNA、序列表序列3所示的單鏈DNA、和限制性內切酶MboII和BsgI。