[發明專利]scFv抗體、其編碼基因及其在制備治療或預防雞傳染性法氏囊病制劑中的應用

有效

• 申請號: 201310311042.2
• 申請日: 2013-07-23
• 公開（公告）號: CN103333242A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 李德山;李天鶴;周兵;李寧;任桂萍;尹杰超
• 申請（專利權）人: 哈爾濱博翱生物醫藥技術開發有限公司
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;C12N15/13;C12N15/70;C12N1/21;G01N33/569;A61K39/42;A61P31/14
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種scFv抗體、其編碼基因及其在制備治療或預防雞傳染性法氏囊病制劑中的應用。

背景技術

雞傳染性法氏囊病（Infectious?Bursal?Disease，IBD）是由雞傳染性法氏囊病病毒（Infectious?Bursal?Disease?Virus，IBDV）引起的一種急性、高度接觸性雞傳染病，具有傳播速度快、傳染性強、感染率及死亡率均高的特點。該病目前已遍布全球各地，是養禽業最重要疾病之一，給養雞企業帶來巨大經濟損失。

IBDV可在雛雞法氏囊中的淋巴細胞，尤其是B淋巴細胞中迅速繁殖，促使B淋巴細胞凋亡，法氏囊極度萎縮，最終導致免疫抑制。抗體藥物目前是有效的治療藥物，高免血清和卵黃抗體在發病早期均可起到良好的效果，但是由于工業化生產可控性差和存在水平傳播疾病等原因而受到限制。

發明內容

本發明的目的是提供一種scFv抗體、其編碼基因及其在制備治療或預防雞傳染性法氏囊病制劑中的應用。

本發明提供了一種單鏈抗體，命名為scFv抗體，包括由重鏈可變區、輕鏈可變區以及它們之間的連接區組成；

所述重鏈可變區為如下（a）或（b）：（a）由序列表中序列1自N末端第1-124位氨基酸殘基組成的蛋白質；（b）將（a）經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的由其衍生的蛋白質；

所述輕鏈可變區為如下（c）或（d）：（c）由序列表中序列1自N末端第140-244位氨基酸殘基組成的蛋白質；（d）將（c）經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的由其衍生的蛋白質。

所述單鏈抗體具體可為如下（e）或（f）：（e）由序列表中序列1所示的蛋白質；（f）將（e）經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同活性的由其衍生的蛋白質。

編碼所述單鏈抗體的基因也屬于本發明的保護范圍。

所述基因中，編碼所述重鏈可變區的DNA分子為如下（1）或（2）或（3）：（1）序列表的序列2自5’末端第1-372位核苷酸所示的DNA分子；（2）在嚴格條件下與（1）限定的DNA序列雜交且編碼具有相同活性的蛋白的DNA分子；（3）與（1）限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且編碼具有相同活性的蛋白的DNA分子。

所述基因中，編碼所述輕鏈可變區的DNA分子為如下（4）或（5）或（6）：（4）序列表的序列2自5’末端第418-732位核苷酸所示的DNA分子；（5）在嚴格條件下與（4）限定的DNA序列雜交且編碼具有相同活性的蛋白的DNA分子；（6）與（4）限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且編碼具有相同活性的蛋白的DNA分子。

所述基因具體可為如下（7）或（8）或（9）或（10）：（7）序列表的序列2自5’末端第1-732位核苷酸所示的DNA分子；（8）序列表的序列2所示的DNA分子；（9）在嚴格條件下與（7）或（8）限定的DNA序列雜交且編碼具有相同活性的蛋白的DNA分子；（10）與（7）或（8）限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且編碼具有相同活性的蛋白的DNA分子。

上述嚴格條件可為在6×SSC，0.5%SDS的溶液中，在65℃下雜交，然后用2×SSC、0.1%SDS和1×SSC、0.1%SDS各洗膜一次。

含有以上任一所述基因的表達盒、重組載體、轉基因細胞系或重組菌均屬于本發明的保護范圍。

基于所述單鏈抗體的其它形式的抗體也屬于本發明的保護范圍。所述其它形式的抗體可為Fab形式的抗體、IgG形式的抗體等。

本發明還保護所述單鏈抗體或所述其它形式的抗體在制備產品中的應用；所述產品的功能為如下（Ⅰ）、（Ⅱ）或（Ⅲ）或（Ⅳ）：（Ⅰ）檢測雞傳染性法氏囊病病毒；（Ⅱ）輔助鑒定雞傳染性法氏囊病病毒；（Ⅲ）預防和/或治療雞傳染性法氏囊病；（Ⅳ）預防和/或治療由雞傳染性法氏囊病病毒誘發的疾病。

含有所述單鏈抗體或所述其它形式的抗體的產品也屬于本發明的保護范圍；所述產品的功能為如下（Ⅰ）、（Ⅱ）或（Ⅲ）或（Ⅳ）：（Ⅰ）檢測雞傳染性法氏囊病病毒；（Ⅱ）輔助鑒定雞傳染性法氏囊病病毒；（Ⅲ）預防和/或治療雞傳染性法氏囊病；（Ⅳ）預防和/或治療由雞傳染性法氏囊病病毒誘發的疾病。

本發明還保護所述單鏈抗體或所述其它形式的抗體在輔助鑒定雞傳染性法氏囊病病毒中的應用。所述應用為非疾病診斷方法。