[發明專利]使用免疫球蛋白片段的促胰島素綴合物

有效

• 申請號: 201310309288.6
• 申請日: 2008-01-04
• 公開（公告）號: CN103435699A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 宋大海;林昌基;宋臺憲;金永勳;權世昌;李寬淳;鄭圣燁;崔仁榮
• 申請（專利權）人: 韓美科學株式會社
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;A61K47/48;A61K38/22;A61P3/10;A61P3/04;A61P15/00;A61P9/00
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 鄭小粵

本申請是于2008年1月4日提交的申請號為2008800017664，發明名稱為“使用免疫球蛋白片段的促胰島素綴合物”的發明專利申請的分案申請。

技術領域

本發明涉及一種用于促胰島素肽的長效配方的促胰島素肽綴合物。具體地，本發明涉及一種顯著提高體內功效持續時間的改良的促胰島素肽的綴合物，該肽綴合物是通過將促胰島素肽和非肽聚合物以及免疫球蛋白Fc共價連接產生的，以及本發明還涉及該肽綴合物的制備方法。

背景技術

肽由于它們的低穩定性而容易變性，由體內的蛋白水解酶降解，從而失去活性，并且肽具有相對較小，從而容易通過腎。因此，為了保持血液濃度和包括作為藥物有效成分的肽的藥物濃度，必須給病人頻繁地服用肽類藥物來保持所需要的血液濃度和藥物濃度。然而，該肽類藥物通常以注射劑的形式給藥，而這樣頻繁的給藥使得病人很痛苦。為解決這些問題，已經進行了許多努力。作為其中的一種努力，已經嘗試通過生物膜增加肽類藥物的傳送以通過口咽或鼻咽吸入來運送肽類藥物。然而，與注射相比，由于體內的傳送效率低，這種方法仍然很難保持該肽類藥物的體內活性。

另一方面，已經進行了很多努力來改善肽類藥物的血液穩定性，并將藥物在血液中以高濃度保持長時間，從而使該藥物的藥效最大化。因此，這種肽類藥物的長效制劑需要增加肽類藥物的穩定性，并保持不會引起病人免疫反應的足夠高濃度的藥物濃度。

作為穩定肽并抑制它通過蛋白水解酶降解的方法，已經進行了一些實驗來修飾對該蛋白水解酶敏感的特定氨基酸序列。例如，由于GLP-1(7-37或7-36酰胺)通過二肽基肽酶IV（DPP?IV）在第8氨基酸（Ala）和第9氨基酸（Asp）之間進行剪切而損失了GLP-1的藥物濃度，因此具有減少血液中葡萄糖濃度以治療2型糖尿病作用的GLP-I(7-37或7-36酰胺)具有4分鐘或更短的生理活性的半衰期（Kreymann等，1987）。因此，已經進行了各種關于具有抗DPP?IV的GLP-I類似物的研究，并且已經進行了用Gly取代Ala（Deacon等，1998；Burcelin等，1999）或用Leu或D-Ala取代Ala（(Xiao等，2001)）的實驗，從而在保持它的活性的同時增加了對DPP?IV的抗性。GLP-1的N末端氨基酸，His⁷對GLP-1的活性是重要的，并且作為DPP?IV的目標。因此，美國專利第5，545，618號描述了用烷基或酰基修飾N末端，并且Gallwitz等描述了第7位His進行N甲基化或а甲基化，或者整個His用咪唑取代來增加對DPP?IV的抗性并保持生理活性。

除了這些修飾，從希拉毒蜥蜴的唾液腺純化的GLP-1類似物exendin-4（美國專利第5，424，686號）具有對DPP?IV的抗性并比GLP-I具有更高的生理活性。因此，它具有比GLP-1的半衰期更長的2至4小時的體內半衰期。然而，僅使用增加DPP?IV抗性的方法，生理活性不能被充分地保持，并且在使用商業可獲得的exendin-4（exenatide）的情況下，它需要一天兩次被注射給病人，這對病人仍然是很痛苦的。

這些促胰島素肽具有一個問題，通常肽的大小很小。從而，它們不能在腎中被重新獲得，并且它們隨后被排出體外。因此，已經使用以化學方法在肽的表面添加例如聚乙二醇（PEG）的具有高溶解度的聚合物來抑制在腎中的損失的方法。

PEG非特異性地結合到特異位點或目標肽的多個位點產生了增加肽的分子量的效果，并從而抑制通過腎的損失，并防止水解，而不產生任何的副作用。例如，國際專利公開第WO2006/076471號申請描述了PEG結合到B型利鈉肽或BNP,BNP結合到NPR-A激活cGMP的產生，cGMP使得動脈血壓降低，并因此作為充血性心力衰竭的治療劑，從而保持生理活性。美國專利第6，924，64號描述了PEG結合到exendin-4的賴氨酸殘基來增加它的體內停留時間。然而，這種方法增加了PEG的分子量，從而增加了肽類藥物的體內停留時間，同時隨著分子量的增加，該肽類藥物的濃度顯著地減少了，并且肽的反應性也降低了。因此，產量被不希望的降低了。