[發(fā)明專利]一種直穗型水稻的穗離體培養(yǎng)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310307591.2
• 申請(qǐng)日: 2013-07-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103355169A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 程方民;蘇達(dá);王復(fù)標(biāo);潘剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 杭州天勤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

1.一種直穗型水稻的穗離體培養(yǎng)方法，包括：

（1）于灌漿初期取水稻離體穗置入凈水中，經(jīng)預(yù)處理后對(duì)穗莖節(jié)以下部位進(jìn)行表面消毒；

（2）將完成表面消毒的水稻離體穗插入裝有無(wú)菌培養(yǎng)液的培養(yǎng)容器內(nèi)，插入培養(yǎng)液的莖段長(zhǎng)度為水稻離體穗莖長(zhǎng)的1/5～1/4；穗器官露出培養(yǎng)容器外，用無(wú)菌脫脂棉固定水稻離體穗并封閉培養(yǎng)容器開(kāi)口；

（3）將固定有水稻離體穗的培養(yǎng)容器置于2～3℃水浴中，水浴水面低于水稻離體穗的莖基部；穗器官層的溫度為20～27℃；

（4）定期更換培養(yǎng)液至水稻籽粒成熟。

2.如權(quán)利要求1所述的穗離體培養(yǎng)方法，其特征在于，所述預(yù)處理為：僅保留水稻離體穗上4～6cm長(zhǎng)的旗葉、完整的旗葉鞘以及穗莖節(jié)以下2～3個(gè)完整節(jié)間，去除其它葉片、葉鞘和莖節(jié)。

3.如權(quán)利要求1所述的穗離體培養(yǎng)方法，其特征在于，所述表面消毒為：先用70%乙醇溶液消毒40～50s，再用1%次氯酸鈉溶液消毒12～18min，最后用無(wú)菌水沖洗至少三次。

4.如權(quán)利要求1所述的穗離體培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟（2）中，先在無(wú)菌水中將水稻離體穗莖基部斜剪1～2cm，再插入培養(yǎng)液中。

5.如權(quán)利要求1所述的穗離體培養(yǎng)方法，其特征在于，所述培養(yǎng)液含有碳源、氮源、大量元素、微量元素、鐵鹽和有機(jī)成分，其中所述碳源的質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)為4～5%，所述氮源的質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)為0.25～0.3%。

6.如權(quán)利要求5所述的穗離體培養(yǎng)方法，其特征在于，所述碳源的質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)為4.5%，所述氮源的質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)為0.25%。

7.如權(quán)利要求5所述的穗離體培養(yǎng)方法，其特征在于，所述碳源為蔗糖，所述氮源為硝酸銨。

8.如權(quán)利要求1所述的穗離體培養(yǎng)方法，其特征在于，所述培養(yǎng)液中含有體積分?jǐn)?shù)為0.07～0.08%的亞硫酸。

9.如權(quán)利要求1～8任一所述的穗離體培養(yǎng)方法，其特征在于，穗器官層的溫度為日間25～27℃，夜間20～22℃。

10.如權(quán)利要求9所述的穗離體培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟（4）中，每隔6～8天更換一次培養(yǎng)液，每次更換時(shí)均需對(duì)水稻離體穗穗莖節(jié)以下部位進(jìn)行表面消毒及莖基部斜剪。