[發明專利]一種快速評價棉花對草甘膦耐受性的方法

有效

• 申請號: 201310307326.4
• 申請日: 2013-07-19
• 公開（公告）號: CN103364355A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發明（設計）人: 馬艷;馬小艷;崔金杰;姜偉麗;雒珺瑜;彭軍;馬亞杰;奚建平
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院棉花研究所
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 蘇蕾;高瑜

技術領域

本申請涉及植物保護技術領域，更具體地，涉及一種快速評價棉花對草甘膦耐受性的方法。

背景技術

棉田雜草危害是我國棉花生產的主要障礙之一，常年造成損失14%～16%，嚴重制約了棉花的優質、高效生產。草甘膦是一種氨基酸生物合成抑制劑，主要通過抑制植物體內5-烯醇丙酮基莽草酸-3-磷酸合成酶（EPSPS）來抑制莽草酸向苯丙氨酸、酪氨酸及色氨酸的轉化，從而使蛋白質合成受到干擾，導致莽草酸在植物體內的積累，最終植物死亡。草甘膦作為一種廣譜內吸滅生性除草劑，在棉田雜草的防除中發揮著重要的作用。但是，由于棉花對草甘膦敏感，用草甘膦進行化學除草的同時，棉花也會受到損害，甚至死亡。

轉基因抗草甘膦棉花的應用不僅可以避免藥害的產生，還可以擴大草甘膦的使用范圍和靈活性。自1997年美國率先開始種植轉基因抗草甘膦棉花以來，抗草甘膦棉花在美國的種植面積占棉花總種植面積從1997年的3.2%增加到2012年的90%以上。目前，我國正在實施轉基因抗草甘膦棉花新品種培育計劃，并且已經分離和鑒定了多個擁有自主知識產權的草甘膦高抗基因，并已經獲得一批穩定表達的單抗草甘膦和具有抗草甘膦、抗蟲復合性狀的轉基因棉花新材料。隨著農業現代化水平的提高，農村的大量勞動力向城市轉移，因此，棉花生產對抗草甘膦品種的需求越來越強烈。轉基因抗草甘膦棉花勢必將成為我國繼抗蟲棉之后有望推廣的另一類轉基因棉花產業化品種。在抗草甘膦棉花品種選育過程中，評價棉花材料對草甘膦的耐受性既是育種成敗的關鍵環節也是轉基因棉花環境安全性評價的內容之一。

目前對棉花草甘膦抗性程度的評價主要采用植株生物測定法，即在容器或田間播種棉花，出苗后用一系列濃度的草甘膦溶液噴施棉花幼苗，根據施藥后棉花的死亡情況及對產量的影響對其抗性進行評價，此方法能夠準確的測定棉花對草甘膦的抗性水平，但所需時間較長，從播種、收獲到得出測定結果需要150天左右，這對于多材料、大批量的測定來說，耗時長、占用空間大、效率低。因此，建立一種快速、簡便且準確有效地評價棉花對草甘膦耐受性的方法，對于今后抗草甘膦棉花培育、推廣及生產應用具有重要意義。

發明內容

本申請的目的是提供一種快速評價棉花對草甘膦耐受性的方法。

具體地，本申請提供一種快速評價棉花對草甘膦耐受性的方法，所述方法包括：

播種待測棉花種子；

棉花子葉期，分別用濃度為0g?a.i./L、1.37g?a.i./L～2.05g?a.i./L、2.73ga.i./L～4.10g?a.i./L和8.20g?a.i./L的草甘膦進行噴施，其中草甘膦濃度0ga.i./L為對照組，其余濃度為試驗組；

噴施3～5天后，測量棉花子葉中的莽草酸含量；

通過比較試驗組的棉花子葉中的莽草酸含量和對照組的棉花子葉中的莽草酸含量在統計學上是否具有顯著差異來判斷棉花對草甘膦的耐受性。

在一些實施方式中，可以在棉花子葉完全平展時，噴施草甘膦。

在一些實施方式中，噴施可以通過噴霧塔來完成。

在一些實施方式中，噴霧塔的噴霧壓力可以為0.1～0.3Mpa，以保證噴霧均勻。

在一些實施方式中，播種待測棉花種子可以是在容器內進行的。

在一些實施方式中，容器可以為直徑9～13cm、高7～10cm的聚乙烯塑料缽，缽的底部可以有1～12個直徑為0.5～1cm的透水孔，透水孔可以由透水材料覆蓋。優選地，所述透水材料可以為單層濾紙。

在一些實施方式中，容器內的基質可以為細沙和營養土。

在一些實施方式中，細沙和營養土的體積比為1：1～2。

在一些實施方式中，細沙和營養土的體積比為1：1.5。

其中，在試驗過程，可以只用細沙作為基質，但是由于單用細沙培養時，沙子容易失水影響棉苗生長，需要經常澆水。試驗發現，細沙與營養土以1:1～2的體積比混合進行試驗，不僅可以保水，而且能保證棉苗生長所需要的營養。

在一些實施方式中，在容器內進行播種的方法可以為從容器底部灌水浸透基質，播種已催芽的待測棉花種子，然后覆蓋基質。