[發明專利]一種基于GC/MS技術的普洱熟茶指紋圖譜識別方法

無效

• 申請號: 201310307285.9
• 申請日: 2013-07-22
• 公開（公告）號: CN103353501A
• 公開（公告）日: 2013-10-16
• 發明（設計）人: 寧井銘;宛曉春;張正竹
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 安徽匯樸律師事務所 34116
• 代理人: 胡敏

技術領域

本發明涉及一種不同種類普洱熟茶識別方法，尤其涉及的是一種基于GC/MS技術的普洱熟茶指紋圖譜識別方法。?

背景技術

普洱熟茶是以曬青毛茶為原料經特殊發酵后加工而成的。在發酵的過程中，毛茶在濕熱、微生物和酶等共同作用下，內含成分發生了酶促氧化、裂解等一系列化學變化，普洱生茶中原有的一些芳香物質組成也發生了變化，芳樟醇等含量減少，同時，1，2，3-三甲氧基苯（1，2，3-Trimethoxy，Benzene）、1，2-二甲氧基苯（1，2-dimethoxy，Benzene）等具有陳香味的成分出現，使發酵后的普洱熟茶具有典型的陳香味。普洱熟茶種類較多，其中7572被公認為是普洱生產中標桿性產品。?

指紋圖譜是一種綜合的，可量化的鑒定手段，已在環境保護、石油勘測、食品評價、種子檢測和品種的鑒別等許多領域得到廣泛的應用。普洱茶指紋圖譜研究已具有一定的技術基礎，其中包括長期的普洱茶化學成分的研究及多種類型儀器分析方法的研究等，大量的文獻數據以及相關數據庫為普洱茶指紋圖譜的研究提供了良好的運作基礎。另外，隨著分析方法向著多樣性、全面性的發展趨勢，這也為指紋圖譜的整體性顯示提供較為完善的技術工具，計算機技術的發展為指紋圖譜的控制和特征圖譜的提取提供了理論和實踐基礎。?

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供了一種基于GC/MS技術的普洱熟茶指紋圖譜識別方法，基于全化學信息對不同種類的普洱熟茶進行識別。?

本發明是通過以下技術方案實現的，本發明包括以下步驟：?

（1）建立普洱熟茶指紋標準圖譜?

a、取不同年份和不同批次的普洱熟茶分別粉碎至40目，利用蒸餾萃取SDE提取香氣物質，樣品量n至少有10個；?

b、GC/MS分析條件為：分離柱為30m×0.25mm×0.25μm石英毛細管柱；載氣為氦氣，流速1.0ml/min，不分流；色譜條件：60℃保持2min，以4℃/min升溫至200℃，保持4min，以1℃/min升溫至210℃，保持4min，再在17min內升溫至升溫至270℃，保持7min，進樣口溫度270℃，連接口溫度270℃；質譜在200℃溫度下運行，電子轟擊源電壓70eV，質譜掃描范圍從質/荷比40至600，每次掃描0.3s，間隔0.2s；光電倍增管PMT電壓230V，GC/MS界面溫度280℃；?

c、計算出所有色譜峰的相對保留時間和峰面積：?

相對保留時間計算公式為：α=tri/trs，其中tri為待測峰的絕對保留時間，trs為參考峰的保留時間；相對峰面積計算公式為：Sr=（待測峰i的峰面積/標準樣品的總面積）×100%；?

d、采用平均矢量法確定共有圖譜：?

平均矢量=∑[(X_1j,X_2j,...,X_ij,...X_nj)/n]?

式中X_ij為當保留時間為R_T=j時的數據；?

e、標準指紋圖譜的建立：?

選擇相對保留時間0.31～3.27之間的29個色譜峰建立普洱熟茶香氣標準指紋圖譜，標準圖譜相對峰面積均在0.14～1.05之間；?

（2）以相同的方法建立待測茶葉的指紋圖譜；?

（3）將待測茶葉的指紋圖譜和普洱熟茶指紋標準圖譜對比，篩選符合普洱熟茶標準指紋圖譜的待測茶葉。?

所述步驟（3）中，在待測茶葉的指紋圖譜中，找出與標準指紋圖譜對應的29個色譜峰的保留時間，并計算相應的相對峰面積；?

將待測茶葉的29個色譜峰的峰面積與標準指紋圖譜進行比較，當相似度均大于93%時，則該待測茶葉為普洱熟茶，否則判為其他茶類。?

所述相似度的計算分別采用夾角余弦和相關系數法：?

X_i為某個待測茶葉對應保留時間下的峰面積或峰高，Y_i為n批樣品（n≥10）對應保留時間下平均峰面積或峰高。?

所述普洱熟茶包括云南省所產的所有普洱熟茶。?

本發明相比現有技術具有以下優點：本發明的樣本前處理簡潔、方便，不需要耗費大量的人力勞動；基于全化學成分的7542普洱熟茶識別方法，精密度、穩定性和重復性較好，識別率高。?

附圖說明

圖1是普洱熟茶GC/MS標準化學圖譜。?

具體實施方式