[發(fā)明專利]一種基于HPLC技術的不同種類普洱生茶指紋圖譜識別方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310306815.8
• 申請日: 2013-07-22
• 公開（公告）號: CN103344730A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發(fā)明（設計）人: 宛曉春;張正竹;寧井銘
• 申請（專利權）人: 安徽農業(yè)大學
• 主分類號: G01N30/86
• 分類號: G01N30/86
• 代理公司: 安徽匯樸律師事務所 34116
• 代理人: 胡敏

1.一種基于HPLC技術的不同種類普洱生茶指紋圖譜識別方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）建立普洱生茶指紋標準圖譜

a、取不同年份和不同批次的普洱生茶分別粉碎至40目，樣品量n至少有10個；

b、稱取茶粉1.0g，加入100mL80%甲醇，25～35℃水浴，超聲輔助提取,10～30min，濾紙過濾，濾渣洗滌至少兩次后合并濾液，定容至200mL，0.22μm濾膜過濾后備用；

c、吸取試樣至高效液相色譜儀，測定，得到不同年份和不同批次的普洱生茶的化學圖譜；色譜條件：色譜柱：waters-C₁₈，5μm，4.6mm×250mm；流動相：A相為0.03%三氟乙酸，B相為已腈，梯度從10%B到60%B，流速1mL/min，36min內完成，檢測波長280nm，每1次完成后，系統(tǒng)平衡15min后再次進樣；

d、計算出所有色譜峰的相對保留時間和峰面積：

相對保留時間計算公式為：α=tri/trs。其中tri為待測峰的絕對保留時間，trs為參考峰的保留時間，相對峰面積計算公式為：Sr=（待測峰i的峰面積/標準樣品的總面積）×100%；

e、采用平均矢量法確定共有圖譜：

平均矢量=∑[(X_1j,X_2j,...,X_ij,...X_nj)/n]

式中X_ij為當保留時間為R_T=j時的數據；

f、標準指紋圖譜的建立：

選擇相對保留時間0.24～1.23之間的16個色譜峰建立普洱生茶標準指紋圖譜，標準圖譜相對峰面積均在0.76～30.26之間；

（2）以相同的方法建立待測茶葉的指紋圖譜；

（3）將待測茶葉的指紋圖譜和普洱生茶指紋標準圖譜對比，篩選符合普洱生茶標準指紋圖譜的待測茶葉。

2.根據權利要求1所述的一種基于HPLC技術的不同種類普洱生茶指紋圖譜識別方法，其特征在于，所述步驟（3）中，在待測茶葉的指紋圖譜中，找出與標準指紋圖譜對應的16個色譜峰的保留時間，并計算相應的相對峰面積；

將待測茶葉的16個色譜峰的峰面積與標準指紋圖譜進行比較，當相似度均大于99%時，則該待測茶葉為普洱生茶，否則判為其他茶類。

3.根據權利要求2所述的一種基于HPLC技術的不同種類普洱生茶指紋圖譜識別方法，其特征在于，所述相似度的計算分別采用夾角余弦和相關系數法：

X_i為某個待測茶葉對應保留時間下的峰面積或峰高，Y_i為n批樣品（n≥10）對應保留時間下平均峰面積或峰高。

4.根據權利要求1所述的一種基于HPLC技術的不同種類普洱生茶指紋圖譜識別方法，其特征在于，所述普洱生茶包括云南省所產的所有普洱生茶。