[發明專利]Miltenberger抗體檢測試紙條及其檢測方法

有效

• 申請號: 201310305476.1
• 申請日: 2013-07-19
• 公開（公告）號: CN103389384A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發明（設計）人: 丁少華;李勇;尹煥才;段生寶;王紅梅;田晶晶;陳曄洲;李冬
• 申請（專利權）人: 中國科學院蘇州生物醫學工程技術研究所
• 主分類號: G01N33/80
• 分類號: G01N33/80
• 代理公司: 蘇州廣正知識產權代理有限公司 32234
• 代理人: 劉述生

技術領域

本發明涉及醫學檢測領域，特別是涉及一種Miltenberger抗體檢測免疫熒光層析試紙條及其檢測方法。

背景技術

MNS血型系統是繼ABO之后發現的第二個血型系統，其抗原的多態性數目僅次于Rh血型系統。MNS血型系統中有一類特殊的Miltenberger亞血型系統，其血型抗原是以人血清免疫抗體所鑒定的一系列低頻率抗原組合的紅細胞表型。該亞系統中Mur、Mil等幾個抗原的發生頻率在歐洲白人中低于千分之一，而在中國人和其他亞洲人群中為3%~10%。一項針對844名廣西侗族人群的調查顯示，Mur稀有血型抗原陽性率為15.4%。而林瑪利等人在1990年針對臺灣各種族的調查顯示，高山原居民的阿美族的Mur血型陽性率則高達88.4%。

抗-Mur發生率在東南亞地區很高，特別是在我國臺灣、香港人群中抗-Mur的發生頻率甚至僅次于抗-A/抗-B。臨床報告證實抗-Mur抗體會導致同種異型免疫性疾病，如輸血不良反應、新生兒溶血病等。伴隨全球化進程，各種族和各國人口在全世界的流動加快，使得Mur抗原在世界各國的臨床意義日益重要。血液免疫學理論和臨床實際都明確提出，在亞洲各國應用的血型抗體篩查紅細胞組和血型抗體鑒定的譜細胞中應該有Mur抗原陽性紅細胞。由于缺少相關試劑，多數醫療機構使用的抗體篩查細胞中并沒有包含Miltenberger血型抗原，常規檢測無法鑒定抗體的特異性，導致對存在該抗體的患者漏檢。由于新鮮紅細胞保存時間很短（最多3個月），Miltenberger抗原陽性紅細胞來源非常有限，Miltenberger血型篩查及其抗體的檢測受到極大地限制。目前Miltenberger血型抗體檢測中面臨的幾個主要問題是：1）由于臨床檢測譜細胞中未使用相應篩選紅細胞，不規則抗體經常漏檢；2）含有稀有抗原的篩選紅細胞的穩定供應得不到長期保證；3）新鮮紅細胞保存時間極短。

由于至今也無商品化供應的抗Miltenberger血型抗原的單克隆抗體，人源血型試劑（人紅細胞試劑和人血清抗體試劑）的固有缺點以及沒有合適的試驗方法，世界各國目前臨床上不能夠常規開展Miltenbergerr血型相容性試驗，只在少數的大型血液中心和血型參比試驗室對一些疑難的血型不相容疾病病人進行相關的檢驗工作。至今，臨床上不能常規開展Miltenberger血型相容性實驗的具體障礙和問題是：Miltenberger抗原試劑和抗體試劑都短缺，紅細胞血球試劑和人血清抗體試劑的固有缺點，以及目前應用的免疫血清學試驗技術方法的缺點等。我國臨床對于Miltenberger血型抗原抗體的重要性及檢測方法的相關研究也很少，目前僅限個案報道。??

澳大利亞CSL公司利用Kode^TM技術，將合成的多肽抗原連接到紅細胞上，制備得到篩檢抗-Mur抗體及抗-MUT抗體的紅細胞。這種技術是將紅細胞與含有功能（表位）基團-連接鏈-脂肪基團（function-epitope-spacer?lipid,?FSL）的液體混合一段時間，攜帶有特殊抗原表位的FSL可以模擬糖脂結構結合于紅細胞表面，從而改變紅細胞的血型。但這種技術只能增加抗原，而不能封閉原有的紅細胞抗原。這一篩查紅細胞已經被用來進行大規模的抗體篩檢。但CSL公司利用Kode^TM技術所制備的仍然是基于存活紅細胞的血型抗原試劑，上述提到的幾個根本問題并沒有得到解決，存在于存活的紅細胞膜上的血型抗原，由于紅細胞容易溶血，抗原性也隨之消亡。

發明內容

本發明主要解決的技術問題是提供一種Miltenberger抗體檢測免疫熒光層析試紙條及其檢測方法，免疫熒光層析技術操作快速簡便，結合檢測儀器能夠實現半定量或定量檢測；該技術能夠解決我國乃至世界上目前缺乏簡便實用的臨床常規Miltenberger血型抗體檢測技術和試劑的難題，輔助臨床因Miltenberger血型抗體引起的新生兒溶血病、輸血不良反應等疾病的診斷，以及進行輸血前相容性實驗檢測，保障臨床安全、有效、科學輸血。

為解決上述技術問題，本發明采用的一個技術方案是：提供一種Miltenberger抗體檢測免疫熒光層析試紙條，包括反應膜、樣品墊、吸收墊和襯板，所述反應膜位于所述底板上，所述反應膜上固定有檢測帶和質控帶，所述樣品墊和所述吸收墊分別與所述反應膜的兩側部分重疊，并位于所述反應膜和所述底板上，所述樣品墊上包括第一加樣點和第二加樣點，所述第一加樣點設置在遠離所述樣品墊與所述反應膜重疊的一側，所述第二加樣點設置在接近所述樣品墊與所述反應膜重疊的一側。