[發明專利]一種基于濁點萃取提取補骨脂素和異補骨脂素的方法

有效

• 申請號: 201310303101.1
• 申請日: 2013-07-18
• 公開（公告）號: CN103408558A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發明（設計）人: 陳惠;羅晶;王巧峰;劉雪英;姜茹
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四軍醫大學
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 徐文權

技術領域

本發明屬于植物活性成分的提取技術領域，涉及一種基于濁點萃取提取補骨脂素和異補骨脂素的方法。?

背景技術

補骨脂素和異補骨脂素是補骨脂中重要的有效成分。由于補骨脂等在植物中的含量低，而單體提取率更低。研究高效的補骨脂素和異補骨脂素提取方法具有重要意義。事實上，單體提取率低的主要原因是第一步從植物中得到有效部位（粗提物）時，多數使用傳統有機溶劑提取法，該工藝回流溫度高，有效成分被氧化或分解破壞、造成提取率低。可見提高補骨脂粗提物提取率是實現高產率提取的前提和關鍵。?

針對植物補骨脂中有效部位提取的方法很多，主要有：?

1）有機溶劑提取法：?

有機溶劑提取法是以有機溶劑作為分散相的一種提取手段，這種方法適用于許多有機成分的提取，例如黃酮類、苷類、香豆素類等。也是目前提取植物中有效部位使用最多的一種提取方法。但主要缺點是：操作繁瑣、提取率低、富集率差。尤其是使用甲醇等有毒有機溶劑，環境污染大、溶劑殘留毒性高等。?

2）其它方法：?

為了克服溶劑提取法的上述缺點，人們對有效部位提取進行了改進，主要包括超臨界萃取法、微波或超聲波輔助提取法等。?

超臨界萃取法,是以二氧化碳等作為超臨界流體溶劑，提取植物補骨脂有效部位。但是超臨界流體萃取法設備屬高壓設備，投資較大，常常需要有機夾帶劑才能達到理想的分離效果。此方法不能避免有機溶劑的使用。?

微波或超聲波輔助提取法：是利用微波或超聲波輔助增加溶質在溶劑中?的溶解性的一種方法。多數情況下在實驗室中使用。但仍需使用有機溶劑，無法避免這些溶劑的毒性和污染問題。?

濁點萃取技術（cloud?point?extraction，簡稱CPE）是一種新興的環保型液-液萃取技術。濁點萃取技術以水代替有機溶劑作為萃取劑，通過加入少量表面活性劑產生濁點現象而達到高效提取分離目的。其原理是：表面活性劑分子在水溶液中能夠形成親水基團向外、憎水基團向內的膠束。該膠束溶液可以使微溶或不溶于水的有機物溶解度大大增加。同時，表面活性劑水溶液在加熱到一定溫度（濁點溫度）以上，溶液變渾濁并出現分相。通過改變實驗參數(如溶液的離子強度、溫度等)引發相分離，最終實現溶質的高效富集和分離。?

與傳統的液液萃取過程相比，濁點萃取分離技術的操作在兩水相之間進行，所以避免了對人體有害的有機溶劑的使用，也避免了揮發性有機溶劑對環境的影響，而且能夠保護被萃取物的原有性質，加快萃取分離速度，提高萃取富集率。而且該技術對于微量甚至痕量物質有良好的富集作用。?

發明內容

本發明解決的問題在于提供一種基于濁點萃取提取補骨脂素和異補骨脂素的方法，該方法無需有毒有害的有機溶劑，增加了提取率，降低了環境污染。?

本發明是通過以下技術方案來實現：?

一種基于濁點萃取提取補骨脂素和異補骨脂素的方法，包括以下操作：?

1）將補骨脂粉末與表面活性劑溶液充分混合后，并在超聲條件下提取；?

2）提取完成后收集提取液，離心，收集上清液并加入電解質調節離子強度，然后在恒溫水浴平衡，離心后上清液分相為表面活性劑的水溶液層和表面活性劑富集層；?

3）在分成兩相之后，表面活性劑富集層用超濾膜過濾，回收表面活性劑，?濾液旋干，得到包含補骨脂素和異補骨脂素的脂溶性類粗提物。?

進一步，具體包括以下步驟：?

1）將補骨脂植物粉末加入到體積分數濃度為10～15%的表面活性劑溶液中，其中液固比為150mL:1g～200mL:1g，在旋渦混合器中充分混合，并于25℃下、300W超聲處理器超聲處理下，提取30～35min；?

2）提取完成后收集提取液，離心，收集上清液并加電解質調節離子強度，其中電解質濃度為2.5～3mol·L^-1，然后在50℃恒溫水浴平衡35～45min后離心，上清液分相為表面活性劑的水溶液層和表面活性劑富集層；?

3）將表面活性劑富集層用0.45μm的超濾膜過濾，回收表面活性劑，濾液旋干，即得包含補骨脂素和異補骨脂素的粗提物。?

所述步驟1）中，表面活性劑的體積濃度為15%，液固比在150mL:1g，提取時間為30min；?

所述步驟2）中，加入2.5mol·L^-1的氯化鈉下在50℃恒溫水浴平衡40min。?

所述的表面活性劑包括：陰離子表面活性劑、陽離子表面活性劑、兩性離子表面活性劑和非離子表面活性劑。?