[發明專利]一種純化FITC標記的蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）的方法

無效

• 申請號: 201310302179.1
• 申請日: 2013-07-15
• 公開（公告）號: CN103468652A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 相建海;謝世筠;李富花
• 申請（專利權）人: 中國科學院海洋研究所
• 主分類號: C12N7/02
• 分類號: C12N7/02
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 周秀梅;李穎

1.一種純化FITC標記的蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）的方法，其特征在于：將經FITC標記的蝦白斑綜合癥病毒混合液利用分子篩柱進行純化；收集含有FITC標記的WSSV的洗脫液，即得到純化的可視化WSSV；其中，分子篩柱填料為G-25M，洗脫液為PBS緩沖液。

2.按權利要求1所述的純化FITC標記的蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）的方法，其特征在于：將經FITC標記的蝦白斑綜合癥病毒混合液轉移至裝填有G-25M分子篩填料的分子篩柱，整個過程用PBS作為洗脫液，并依靠重力進行洗脫；收集含有FITC標記的WSSV的洗脫液，即得到純化的可視化WSSV；其中，裝填有G-25M分子篩填料的分子篩柱先經2倍柱體積的PBS清洗。

3.按權利要求1或2所述的純化FITC標記的蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）的方法，其特征在于：所述FITC標記的WSSV混合液為將保存于PBS溶液中濃度為3.0×10⁶Copy/μl的蝦白斑綜合癥病毒與FITC溶液按照體積比5-10:1混合，室溫下孵育0.5-2h。

4.按權利要求3所述的純化FITC標記的蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）的方法，其特征在于：所述FITC溶液濃度為1μg/μl。

5.按權利要求3所述的純化FITC標記的蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）的方法，其特征在于：所述孵育在水平搖床或雜交爐中進行。

6.按權利要求5所述的純化FITC標記的蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）的方法，其特征在于：所述水平搖床轉速為30-100rpm。

7.按權利要求1或2所述的純化FITC標記的蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）的方法，其特征在于：所述收集的洗脫液經考馬斯亮藍法檢測蛋白含量，將病毒含量最高（即藍色最深）洗脫液混合，即得到含有FITC標記的WSSV的溶液，置于4℃避光保存。