[發明專利]一種通過流加有機氮源提高腺苷發酵產量的方法

無效

• 申請號: 201310301844.5
• 申請日: 2013-07-18
• 公開（公告）號: CN103409485A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發明（設計）人: 陳寧;劉玥;何菊華;徐慶陽;謝希賢;張成林;劉淑云
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: C12P19/40
• 分類號: C12P19/40;C12R1/125
• 代理公司: 天津佳盟知識產權代理有限公司 12002
• 代理人: 侯力

1.一種通過流加有機氮源提高腺苷發酵產量的方法，所述方法采用分批式補料發酵工藝生產腺嘌呤核苷，發酵菌株為枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）XGL，操作步驟包括：

（1）斜面培養：將枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）XGL接種至活化斜面，28~32?℃培養20~28?h；

（2）種子培養：用接種環刮取斜面菌種接種至種子培養基，28~33?℃，180~220?rpm培養8~11?h，作為發酵種子液；

（3）分批發酵培養：按10~15%的接種量轉接至裝有發酵培養基的發酵罐中，30~34?℃，溶氧維持在10~20%，用NH₃·H₂O調節pH，pH為6.0~7.0，培養時間50~60?h，并且在菌體OD_600*20達到1.0~1.5以后，每隔3~6?h分批勻速流加氮源酵母粉，濃度為1~5g/L，共流加6~12次。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（3）中每次流加氮源酵母粉的量為10~50?mL。

3.根據權利要求書1或2所述的方法，其特征在于：

（1）斜面培養基成分以g/L計：葡萄糖?1~3，蛋白胨?5~10，牛肉膏?5~10，酵母粉?2~5?，NaCl?1~2.5，瓊脂20~30，pH?7.0~7.2；

（2）種子培養基成分以g/L計：口服葡萄糖?10~20，玉米漿?15~25?mL/L，豆粕水解液5~10mL/L，酵母粉5~10?，味精3~8，蛋白胨?5~10，KH₂PO₄?0.5~1.5，MgSO₄·7H₂O?0.2~0.8，尿素?2~7，黃嘌呤0.01~0.05，組氨酸0.01~0.05，?pH?7.0~7.2；

（3）液體發酵培養基成分以g/L計：口服葡萄糖?80~120，酵母膏?12~18，味精8~12，K₂HPO₄?1~3，黃嘌呤?0.01~0.05，組氨酸?0.01~0.05，MgSO₄·7H₂O?1~5，MnSO_4?0.003~0.006，FeSO₄·7H2O?0.003~0.006，CaCl2?1~3?，玉米漿10~20?mL/L，豆粕水解液10~30?mL/L。