[發明專利]一種快速鑒定和定量單鏈小分子核酸組合的方法

在審

• 申請號: 201310301512.7
• 申請日: 2013-07-16
• 公開（公告）號: CN104293897A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: 譚曉剛
• 申請（專利權）人: 譚曉剛
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12M1/34
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 祝蓮君;雷芳

1.一種檢測樣品中單鏈小分子核酸的方法，其特征在于，包括步驟：

(i)將待測樣品與檢測溶液混合，形成檢測混合物；

其中，所述檢測溶液含有檢測探針、捕獲探針和報告探針，并且所述檢測探針具有：分別位于側翼的捕獲探針結合區和報告探針結合區，以及位于所述捕獲探針結合區和所述報告探針結合區之間的目標核酸分子結合區；

(ii)使所述檢測混合物進行雜交反應，從而形成含“目標核酸分子-捕獲探針-報告探針-檢測探針”四元復合物的、雜交后的檢測混合物；

(iii)將所述雜交后的檢測混合物在層析介質上進行層析，其中所述的層析介質設有一個或多個復合物捕獲區，從而將所述四元復合物捕獲于所述的復合物捕獲區，形成一條或多條層析帶；以及

(iv)檢測所述層析帶中所述四元復合物的存在與否和/或數量，從而確定所述樣品中小分子核酸的存在與否和/或數量。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的捕獲探針帶有或連有結合基團，而所述的復合物捕獲區固定有捕獲基團，所述的捕獲基團特異性捕獲或結合于所述的結合基團。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的報告探針帶有或連有報告基團或可檢測標記。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的檢測探針具有選自下組的一個或多個特征：

所述捕獲探針結合區是捕獲探針的互補序列；

所述報告探針結合區是報告探針的互補序列；和

所述的目標核酸分子結合區是待檢測目標核酸分子的互補序列。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的復合物捕獲區上連接有用于檢測小分子核酸分子的結合蛋白或抗體；和/或

所述層析介質上還設有陽性對照區域，所述陽性對照區域上連接有用于直接檢測報告基團的結合蛋白或抗體。

6.一種側流片，所述側流片包括層析介質、位于層析介質一端的加樣區、和位于層析介質另一端的任選的吸水片，以及用于固定層析介質的夾持和固定材料，其特征在于，

所述層析介質上設有一個或多個連接有捕獲基團的捕獲區，用于捕獲結合基團；

所述層析介質上設有連接有直接檢測報告基團的陽性對照區，用于結合報告基團；和

所述層析介質上還設有加樣區，用于加入待測樣品。

7.一種檢測包含單鏈小分子核酸的樣品的試劑盒，其特征在于，包括：

檢測溶液，所述檢測溶液中包含捕獲探針、檢測探針和報告探針；

一個或多個容器，用于盛放檢測溶液；

如權利要求6所述的側流片；

任選的加樣裝置；和

說明書。

8.如權利要求6所述的側流片或如權利要求7所述的試劑盒的用途，其特征在于，用于檢測待測樣品中的單鏈小分子核酸。

9.一種疾病預檢裝置，其特征在于，所述裝置包括權利要求6所述的側流片，以及任選的用于檢測所述側流片的檢測信號的檢測設備(或檢測器)。

10.一種檢測包含單鏈小分子核酸的樣品的方法，其特征在于，使用捕獲探針，檢測探針和報告探針，在層析介質上通過專一性的抗原抗體反應和/或蛋白質和其專一性結合的化學基團的結合來快速鑒定單鏈小分子核酸含量。