[發明專利]胡桃醌在制備治療腦腫瘤藥物中的用途

在審

• 申請號: 201310297874.3
• 申請日: 2013-07-16
• 公開（公告）號: CN104288134A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發明（設計）人: 毛穎;花瑋;陳亮;朱巍
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬華山醫院
• 主分類號: A61K31/122
• 分類號: A61K31/122;A61P35/00
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

技術領域

本發明屬中藥制藥領域，涉及胡桃醌制制藥中的新用途，具體涉及胡桃醌在制備治療腦腫瘤藥物中的用途。

背景技術

腦腫瘤尤其是以惡性膠質瘤（glioma）為代表的腦腫瘤，一直以來是腫瘤化療領域的最后堡壘。臨床實踐顯示，所述的惡性膠質瘤(WHO?III、IV級)治愈率低，復發率高，預后差。研究顯示，由于大多數膠質瘤呈浸潤性生長，與正常組織無明顯分界，因此單靠手術無法根治；而且臨床治療中雖然術后輔助化療、放療，但效果仍不理想，統計顯示，惡性膠質瘤的中位生存期僅51周。2002年Stewart對12個隨機惡性膠質瘤化療臨床試驗進行Meta分析，結果表明，亞硝脲類藥物作為膠質瘤手術加放療后的輔助治療的作用有限，僅能將1年生存率從40%提高至46%，2年生存率從15%提高至20%。目前已知，替莫唑胺是一種口服烷化劑，體內具有良好的抗腫瘤活性；2005年，Stupp發表了具有里程碑意義的的III期臨床研究結果，替莫唑胺聯合手術加放療膠質母細胞瘤患者較手術聯合放療方案組中位生存期延長2個月；而其它化療藥物有諸多報道在體外、甚至動物實驗有效，但均未得到隨機、對照臨床實驗證實；因此，惡性腦腫瘤化療效果一直徘徊不前。

胡桃醌（Juglone，化學名稱：5-羥基-1,4-萘醌，5-羥基-1,4-萘二酮）屬于萘醌類成分，存在于胡桃科核桃屬植物胡桃楸（Jugland?mandshurica?Maxim）和核桃（Juglans?regia?L）的根皮、樹皮、青果皮（青龍衣）、葉中，1957年國外首先報道了胡桃醌的提純和鑒定，1985年許紹惠等從核桃的新鮮根皮、枝皮和青龍衣中分離出胡桃醌，并鑒定了結構，與國外報道一致。

現代藥理已明確，所述胡桃醌具有廣泛的藥理作用，具有明確的抗腫瘤作用；此外，其還具有抗菌、抗炎等藥理作用。胡桃醌屬脂溶性藥物，能輕易透過血腦屏障，有抗腫瘤藥物研究發現，其尤其是針對腦腫瘤而言具有重大意義。目前，胡桃醌的抗腫瘤作用國內外均有報道，但胡桃醌的抗腫瘤作用還停留在初級研究階段。有研究結果顯示，從核桃楸中提取分離出的胡桃醌，對于S₁₈₀實體瘤、小鼠腹水型肝癌和自發性胃癌有明顯的抗癌活性。許紹惠等報道胡桃醌對小鼠移植性乳腺癌有明顯的抗癌活性，使艾氏腹水癌細胞的有絲分裂異常；張野平報道胡桃醌具有抗腫瘤活性，對HePA小鼠生命延長率為95%，抑制S₁₈₀實體瘤達50%。Sugie等報道胡桃醌對大鼠腸腫瘤形成有抑制作用，可能成為有希望的化療藥物。

但迄今為止，尚未見有關胡桃醌針對惡性腦腫瘤的報道，對于胡桃醌能否穿透血腦屏障，是否有抗腦腫瘤作用以及具體機制目前尚不清楚。

發明內容

本發明的目的是提供胡桃醌在制藥中的新用途，具體涉及胡桃醌在制備治療腦腫瘤化療藥物中的應用。

本發明中，所述胡桃醌具有式（Ⅰ）的結構，其化學式為C₁₀H₆O₃?，分子量為174.16，?

?（Ⅰ）??

本發明所述胡桃醌其性質為：

可從苯與石油醚中結晶出的胡桃醌為黃色針狀結晶；微溶于熱水，可溶于乙醇、乙醚，以任意比溶于苯、氯仿；溶于堿液呈紫紅色；可升華，可隨水蒸氣蒸發；

本發明中，所述胡桃醌以氫化胡桃醌（氫醌）的苷的形式存在于胡桃科植物胡桃及其同屬黑核桃的未成熟外果皮（青皮）中；可天然提取，也可由5,8-二羥基-1-萘滿酮被氧化銀、二氧化錳或2,3-二氯-5,6-二氰對苯醌氧化制得。

?

本發明經體內、外試驗證實，胡桃醌在體內外對腦腫瘤尤其是惡性膠質瘤均有明顯的抑制作用，可用于制備腦腫瘤化療藥物，尤其是制備治療惡性膠質瘤化學藥物。?

本發明進行了體外殺傷試驗：

采用U87膠質母細胞瘤細胞株使其生長至80%融合度時，進行PBS溶液洗滌，0.25%胰蛋白酶消化，得細胞懸液置入離心管800轉離心，棄上清，加入完全培養基重懸細胞后，吸細胞懸液置于細胞計數板，臺盼藍染液顯微鏡下計數，根據計數結果，將細胞懸液稀釋接種96孔板中，藥物終濃度梯度設置為10,20,40umol，藥物作用72小時后，用CCK-8法檢測細胞殺傷比率，IC50值采用正規幾率單位法通過SPSS18.0軟件計算，結果顯示，胡桃醌IC?50為6?ug/ml。

本發明還進行了動物試驗：