[發(fā)明專利]建立小鼠可移植乳腺癌腫瘤細胞懸液原位模型的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310296578.1
• 申請日: 2013-07-16
• 公開（公告）號: CN103330604A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蔣志文;劉浩;蔣琛琛
• 申請（專利權(quán)）人: 蚌埠醫(yī)學(xué)院
• 主分類號: A61D7/00
• 分類號: A61D7/00
• 代理公司: 蚌埠鼎力專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 34102
• 代理人: 王琪

1.建立小鼠可移植乳腺癌腫瘤細胞懸液原位模型的方法，包括以下步驟：

a）在無菌條件下切取小鼠自發(fā)乳腺癌瘤塊，用無菌的緩沖液清洗3—4遍；

b）將瘤塊網(wǎng)篩中研磨，用無菌的緩沖液清洗研磨后的細胞，以2500r/min、5min離心沉淀兩次，細胞沉底；

c）計數(shù)細胞，用培養(yǎng)液調(diào)配細胞濃度至(0.7—1.9）×10⁶cell/mL的腫瘤細胞懸液；

d）每只小鼠前肢腋窩皮下注射0.2—0.4mL的腫瘤細胞懸液；

e）常規(guī)條件下飼養(yǎng)，正常繁殖9—21天，完成建立小鼠可移植乳腺癌原位模型。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立小鼠可移植乳腺癌腫瘤細胞懸液原位模型的方法，其特殊在于：所述的緩沖液為磷酸鹽緩沖液，包括磷酸二氫鉀：0.24g/L，磷酸氫二鈉：1.440g/L，氯化鈉：8.006g/L，氯化鉀：0.201g/L，加去離子水約800mL充分攪拌溶解，然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4，定容到1L，最后高溫高壓滅菌后室溫保存。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立小鼠可移植乳腺癌腫瘤細胞懸液原位模型的方法，其特殊在于：所述的網(wǎng)篩為300—400目。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的建立小鼠可移植乳腺癌腫瘤細胞懸液原位模型的方法，其特殊在于：所述培養(yǎng)液為DMEM培養(yǎng)液，包括體積比為10%的滅活小牛血清，HEPES緩沖劑：20mmol/L，碳酸氫鈉：2.0g/L，青霉素：100IU/L，鏈霉素：100μg/mL，慶大霉素：10μg/mL。