[發明專利]一種產黃曲霉毒素菌株的鑒定培養基及其鑒定方法

無效

• 申請號: 201310296249.7
• 申請日: 2013-07-16
• 公開（公告）號: CN103387941A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發明（設計）人: 許艷麗;鮑蕾;靜平;吳振興;孫靜克;唐靜
• 申請（專利權）人: 山東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12Q1/04;C12R1/66;C12R1/67
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技術領域

本發明涉及一種產黃曲霉毒素菌株鑒定的培養基及其鑒定方法，屬于微生物鑒定培養技術領域。

背景技術

黃曲霉毒素(Aflatoxins)主要是由黃曲霉和寄生曲霉產生的一類具有很強毒性和致癌性的真菌毒素，廣泛存在于花生、玉米、麥類、稻谷等農產品中，嚴重危害人、畜、禽類健康。寄生曲霉的所有菌株均能產生B組和G組黃曲霉毒素，而黃曲霉只有部分菌株能產生黃曲霉毒素，且只能產生B組黃曲霉毒素。

研究發現，黃曲霉是糧食和食品中最常見的真菌，但并非所有黃曲霉菌株都能產生毒素，根據Matles等人報道，從自然界中分離的黃曲霉菌株中，只有10%-30%能產毒素；產黃曲霉毒素的真菌能夠侵染多種農作物并在其中生長，收獲期前農作物中黃曲霉毒素的污染主要由于在其生長后期出現炎熱、干旱的氣候條件，這種條件能夠刺激產黃曲霉毒素的真菌生長，因此當生產地大面積出現這種氣候時，就會導致農作物明顯的感染黃曲霉毒素的現象；如果農作物在生長過程中遭遇病蟲危害、土壤貧瘠、早霜、倒伏以及潮濕多雨等對作物生長不利的條件，也會促使黃曲霉毒素的產生；收獲后黃曲霉毒素的污染主要是由于儲存條件不當造成的，如倉儲溫度高、濕度大、通風透氣條件不良等。據FAO報道，全球每年約有25%的農作物遭受霉菌及其毒素的污染，約有2%的農作物因污染嚴重而失去營養和經濟價值。由此估計，全球每年因霉菌毒素污染而造成的直接或間接經濟損失達數百億美元。中國是世界花生生產大國，花生總產量和出口量均占世界第一，是我國為數不多的具有明顯競爭優勢的出口創匯農產品。近年來，由于花生黃曲霉毒素問題，影響了我國花生的衛生質量，制約了我國花生的出口。

黃曲霉毒素污染問題的嚴重性眾所周知，但是目前研究的焦點主要集中在對黃曲霉毒素的檢測上，并沒有真正從菌株產毒這一源頭上進行有效防控；目前國內對產毒真菌的鑒定主要是依據形態學特征，而對于黃曲霉并不區分產毒與不產毒菌株。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：提供一種配方簡單，結果準確可靠的產黃曲霉毒素菌株鑒定培養基及其鑒定產黃曲霉毒素菌株的方法。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：

一種產黃曲霉毒素菌株鑒定的培養基，其特征在于，包括下列重量的物質：馬鈴薯淀粉5-15g，葡萄糖15-30g，瓊脂10-20g，甲基化β-環糊精5-15g，蒸餾水1L；所述的培養基的pH值為5-6。

優選的，上述培養基中各種物質的含量為：馬鈴薯淀粉10g，葡萄糖20g，瓊脂15g，甲基化β-環糊精8g，蒸餾水1L。

申請人研究發現，加入(NH₄)₂SO₄和ZnSO₄能夠刺激菌株的毒素產生。

優選的，培養基包括上述兩種無機鹽的含量為：1-8g(NH₄)₂SO₄和0.01-0.06gZnSO₄。

優選的，上述兩種無機鹽的量為：4g(NH₄)₂SO₄和0.02gZnSO₄。

優選的，上述兩種無機鹽的量為：2g(NH₄)₂SO₄和0.06gZnSO₄。

一種鑒定產黃曲霉毒素菌株的方法，包括下列步驟：

（1）培養基的制備：將5-15g馬鈴薯淀粉、15-30g葡萄糖、10-20g瓊脂、5-15g甲基化β-環糊精、1-8g(NH₄)₂SO₄和0.01-0.06gZnSO₄加蒸餾水1L溶解煮沸，微涼后調節pH值為5-6，將培養基倒在培養皿中；

（2）培養：待培養基凝固后，將需要鑒定的菌株接種在培養基上，28?℃培養5天，在365?nm的紫外燈下觀察結果。

本發明的培養基原料易得，提高功效，節約成本，具有極大的應用和推廣價值；鑒定產毒黃曲霉菌株的方法操作簡單，不需要特殊的儀器設備，快速、簡便、準確和可靠。

附圖說明

下面結合附圖對本發明的具體實施方式作進一步詳細的說明。

圖1是產黃曲霉毒素的菌株在實施例1所述的培養基上的菌落圖。

圖2是產黃曲霉毒素的菌株在普通的霉菌培養基上的菌落圖。

圖3是不產黃曲霉毒素的菌株在本發明的培養基上的菌落圖。