[發(fā)明專利]一種產(chǎn)黃曲霉毒素菌株的鑒定培養(yǎng)基及其鑒定方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310296249.7
• 申請日: 2013-07-16
• 公開（公告）號: CN103387941A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許艷麗;鮑蕾;靜平;吳振興;孫靜克;唐靜
• 申請（專利權(quán)）人: 山東出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12Q1/04;C12R1/66;C12R1/67
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• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種產(chǎn)黃曲霉毒素菌株鑒定的培養(yǎng)基及其鑒定方法，屬于微生物鑒定培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

黃曲霉毒素(Aflatoxins)主要是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的一類具有很強(qiáng)毒性和致癌性的真菌毒素，廣泛存在于花生、玉米、麥類、稻谷等農(nóng)產(chǎn)品中，嚴(yán)重危害人、畜、禽類健康。寄生曲霉的所有菌株均能產(chǎn)生B組和G組黃曲霉毒素，而黃曲霉只有部分菌株能產(chǎn)生黃曲霉毒素，且只能產(chǎn)生B組黃曲霉毒素。

研究發(fā)現(xiàn)，黃曲霉是糧食和食品中最常見的真菌，但并非所有黃曲霉菌株都能產(chǎn)生毒素，根據(jù)Matles等人報(bào)道，從自然界中分離的黃曲霉菌株中，只有10%-30%能產(chǎn)毒素；產(chǎn)黃曲霉毒素的真菌能夠侵染多種農(nóng)作物并在其中生長，收獲期前農(nóng)作物中黃曲霉毒素的污染主要由于在其生長后期出現(xiàn)炎熱、干旱的氣候條件，這種條件能夠刺激產(chǎn)黃曲霉毒素的真菌生長，因此當(dāng)生產(chǎn)地大面積出現(xiàn)這種氣候時(shí)，就會導(dǎo)致農(nóng)作物明顯的感染黃曲霉毒素的現(xiàn)象；如果農(nóng)作物在生長過程中遭遇病蟲危害、土壤貧瘠、早霜、倒伏以及潮濕多雨等對作物生長不利的條件，也會促使黃曲霉毒素的產(chǎn)生；收獲后黃曲霉毒素的污染主要是由于儲存條件不當(dāng)造成的，如倉儲溫度高、濕度大、通風(fēng)透氣條件不良等。據(jù)FAO報(bào)道，全球每年約有25%的農(nóng)作物遭受霉菌及其毒素的污染，約有2%的農(nóng)作物因污染嚴(yán)重而失去營養(yǎng)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。由此估計(jì)，全球每年因霉菌毒素污染而造成的直接或間接經(jīng)濟(jì)損失達(dá)數(shù)百億美元。中國是世界花生生產(chǎn)大國，花生總產(chǎn)量和出口量均占世界第一，是我國為數(shù)不多的具有明顯競爭優(yōu)勢的出口創(chuàng)匯農(nóng)產(chǎn)品。近年來，由于花生黃曲霉毒素問題，影響了我國花生的衛(wèi)生質(zhì)量，制約了我國花生的出口。

黃曲霉毒素污染問題的嚴(yán)重性眾所周知，但是目前研究的焦點(diǎn)主要集中在對黃曲霉毒素的檢測上，并沒有真正從菌株產(chǎn)毒這一源頭上進(jìn)行有效防控；目前國內(nèi)對產(chǎn)毒真菌的鑒定主要是依據(jù)形態(tài)學(xué)特征，而對于黃曲霉并不區(qū)分產(chǎn)毒與不產(chǎn)毒菌株。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：提供一種配方簡單，結(jié)果準(zhǔn)確可靠的產(chǎn)黃曲霉毒素菌株鑒定培養(yǎng)基及其鑒定產(chǎn)黃曲霉毒素菌株的方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

一種產(chǎn)黃曲霉毒素菌株鑒定的培養(yǎng)基，其特征在于，包括下列重量的物質(zhì)：馬鈴薯淀粉5-15g，葡萄糖15-30g，瓊脂10-20g，甲基化β-環(huán)糊精5-15g，蒸餾水1L；所述的培養(yǎng)基的pH值為5-6。

優(yōu)選的，上述培養(yǎng)基中各種物質(zhì)的含量為：馬鈴薯淀粉10g，葡萄糖20g，瓊脂15g，甲基化β-環(huán)糊精8g，蒸餾水1L。

申請人研究發(fā)現(xiàn)，加入(NH₄)₂SO₄和ZnSO₄能夠刺激菌株的毒素產(chǎn)生。

優(yōu)選的，培養(yǎng)基包括上述兩種無機(jī)鹽的含量為：1-8g(NH₄)₂SO₄和0.01-0.06gZnSO₄。

優(yōu)選的，上述兩種無機(jī)鹽的量為：4g(NH₄)₂SO₄和0.02gZnSO₄。

優(yōu)選的，上述兩種無機(jī)鹽的量為：2g(NH₄)₂SO₄和0.06gZnSO₄。

一種鑒定產(chǎn)黃曲霉毒素菌株的方法，包括下列步驟：

（1）培養(yǎng)基的制備：將5-15g馬鈴薯淀粉、15-30g葡萄糖、10-20g瓊脂、5-15g甲基化β-環(huán)糊精、1-8g(NH₄)₂SO₄和0.01-0.06gZnSO₄加蒸餾水1L溶解煮沸，微涼后調(diào)節(jié)pH值為5-6，將培養(yǎng)基倒在培養(yǎng)皿中；

（2）培養(yǎng)：待培養(yǎng)基凝固后，將需要鑒定的菌株接種在培養(yǎng)基上，28?℃培養(yǎng)5天，在365?nm的紫外燈下觀察結(jié)果。

本發(fā)明的培養(yǎng)基原料易得，提高功效，節(jié)約成本，具有極大的應(yīng)用和推廣價(jià)值；鑒定產(chǎn)毒黃曲霉菌株的方法操作簡單，不需要特殊的儀器設(shè)備，快速、簡便、準(zhǔn)確和可靠。

附圖說明

下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的具體實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。

圖1是產(chǎn)黃曲霉毒素的菌株在實(shí)施例1所述的培養(yǎng)基上的菌落圖。

圖2是產(chǎn)黃曲霉毒素的菌株在普通的霉菌培養(yǎng)基上的菌落圖。

圖3是不產(chǎn)黃曲霉毒素的菌株在本發(fā)明的培養(yǎng)基上的菌落圖。