[發明專利]彈性蛋白水凝膠及其制備方法有效
| 申請號: | 201310294656.4 | 申請日: | 2013-07-12 |
| 公開(公告)號: | CN103351470A | 公開(公告)日: | 2013-10-16 |
| 發明(設計)人: | 侯信;閆玉芳;尚躍再 | 申請(專利權)人: | 天津大學 |
| 主分類號: | C08J3/24 | 分類號: | C08J3/24;C08J3/075;C08L89/00;C08K5/07 |
| 代理公司: | 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201 | 代理人: | 王秀奎 |
| 地址: | 300072*** | 國省代碼: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 彈性 蛋白 凝膠 及其 制備 方法 | ||
1.彈性蛋白水凝膠,其特征在于,按照下述步驟進行:
步驟1,將α-彈性蛋白粉末后加入蒸餾水磁力攪拌下使其完全懸浮于水中,彈性蛋白溶液濃度為50-200mg/mL,攪拌時間為30min;
步驟2,將戊二醛溶液加入步驟1制得的懸浮液中進行交聯反應并定形,定形后用蒸餾水清洗表面未反應的戊二醛小分子至清洗完全,制得彈性蛋白水凝膠;所述戊二醛與彈性蛋白質量比為5-30%;交聯反應溫度為4-15℃,時間為4-6h;定形溫度為40-60℃,時間為2-5h。
2.根據權利要求1所述的彈性蛋白水凝膠,其特征在于,在所述步驟2中,所述戊二醛與彈性蛋白質量比為10-15%。
3.根據權利要求1所述的彈性蛋白水凝膠,其特征在于,所述α-彈性蛋白購于sigma,分子量為70—72KD(數均)。
4.根據權利要求1所述的彈性蛋白水凝膠,其特征在于,所述α-彈性蛋白按照如下步驟進行制備:
(1)用草酸溶液煮沸降解彈性蛋白,脫除脂肪及其他類型蛋白質;
(2)用草酸溶液煮沸降解(1)制得的彈性蛋白至全部降解,得到水解彈性蛋白;
(3)使用氫氧化鈉溶液調節(2)所得的溶液pH值,收集沉淀;
(4)清洗(3)收集的沉淀,凍干,得到純凈α-彈性蛋白,備用。
在上述彈性蛋白的制備過程中,所述步驟(1)基質材料為牛頸韌帶經丙酮浸泡進行初步脫脂,浸泡時間為24h,并切成約5mm×5mm×5mm規則粒狀得到;所述的草酸溶液濃度為0.3-0.7mol/L,降解時間為30-60min;用蒸餾水洗凈表面油脂及其他類型蛋白質;
所述步驟(2)所用草酸溶液濃度為1-2mol/L,降解時間為4-6h;
所述步驟(3)所用氫氧化鈉溶液濃度為1-6mol/L,調節pH值到4-5,彈性蛋白凝聚形成沉淀;
所述步驟(4)沉淀采用大量蒸餾水除去小分子物質;凍干時間為24h;凍干后彈性蛋白研磨成細粉狀。
5.彈性蛋白水凝膠的制備方法,其特征在于,按照下述步驟進行:
步驟1,將α-彈性蛋白粉末后加入蒸餾水磁力攪拌下使其完全懸浮于水中,彈性蛋白溶液濃度為50-200mg/mL,攪拌時間為30min;
步驟2,將戊二醛溶液加入步驟1制得的懸浮液中進行交聯反應并定形,定形后用蒸餾水清洗表面未反應的戊二醛小分子至清洗完全,制得彈性蛋白水凝膠;所述戊二醛與彈性蛋白質量比為5-30%;交聯反應溫度為4-15℃,時間為4-6h;定形溫度為40-60℃,時間為2-5h。
6.根據權利要求5所述的彈性蛋白水凝膠的制備方法,其特征在于,在所述步驟2中,所述戊二醛與彈性蛋白質量比為10-15%。
7.根據權利要求5所述的彈性蛋白水凝膠的制備方法,其特征在于,所述α-彈性蛋白購于sigma,分子量為70—72KD(數均)。
8.根據權利要求5所述的彈性蛋白水凝膠的制備方法,其特征在于,所述α-彈性蛋白按照如下步驟進行制備:
(1)用草酸溶液煮沸降解彈性蛋白,脫除脂肪及其他類型蛋白質;
(2)用草酸溶液煮沸降解(1)制得的彈性蛋白至全部降解,得到水解彈性蛋白;
(3)使用氫氧化鈉溶液調節(2)所得的溶液pH值,收集沉淀;
(4)清洗(3)收集的沉淀,凍干,得到純凈α-彈性蛋白,備用。
在上述彈性蛋白的制備過程中,所述步驟(1)基質材料為牛頸韌帶經丙酮浸泡進行初步脫脂,浸泡時間為24h,并切成約5mm×5mm×5mm規則粒狀得到;所述的草酸溶液濃度為0.3-0.7mol/L,降解時間為30-60min;用蒸餾水洗凈表面油脂及其他類型蛋白質;
所述步驟(2)所用草酸溶液濃度為1-2mol/L,降解時間為4-6h;
所述步驟(3)所用氫氧化鈉溶液濃度為1-6mol/L,調節pH值到4-5,彈性蛋白凝聚形成沉淀;
所述步驟(4)沉淀采用大量蒸餾水除去小分子物質;凍干時間為24h;凍干后彈性蛋白研磨成細粉狀。
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