[發明專利]小鼠抗人PRRT2單克隆抗體及其制備和應用在審
| 申請號： | 201310294241.7 | 申請日： | 2013-07-15 |
| 公開（公告）號： | CN104292333A | 公開（公告）日： | 2015-01-21 |
| 發明（設計）人： | 吳志英;劉功祿;李宏福 | 申請（專利權）人： | 復旦大學附屬華山醫院 |
| 主分類號： | C07K16/28 | 分類號： | C07K16/28;C12N5/20;G01N33/68;C12R1/91 |
| 代理公司： | 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吳桂琴 |
| 地址： | 200031 上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 小鼠 prrt2 單克隆抗體 及其 制備 應用 | ||
1.一種抗人PRRT2單克隆抗體，其特征在于，所述的抗人PRRT2單克隆抗體對應的抗原表位的序列如SEQ?ID?NO?3-?SEQ?ID?NO?8中的任意一條所示。
2.如權利要求1所述的抗人PRRT2單克隆抗體，其特征在于，其對應的抗原表位的序列如SEQ?ID?NO?6?或者?SEQ?ID?NO?7所示。
3.一種抗人PRRT2單克隆抗體，其特征在于，它由保藏號為CGMCC?No.7810的雜交瘤細胞產生。
4.一種產生抗人PRRT2單克隆抗體的雜交瘤細胞，其特征在于，它是分泌PRRT2抗體的小鼠骨髓瘤融合細胞株?9293-1hz-3P2，保藏號為CGMCC?No.7810。
5.權利要求1所述的抗人PRRT2單克隆抗體的制備方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：
從PRRT2蛋白序列中選擇1-6個肽片段作為抗原表位，通過接頭將不同肽片段串聯到一起；所述的抗原表位的序列選自SEQ?ID?NO?3-?SEQ?ID?NO?8中的任意一條或者若干條；
合成抗原表位對應的目的cDNA序列，誘導表達串聯多肽免疫原；
佐劑聯合所述免疫原多點免疫小鼠，經細胞融合和篩選獲得單克隆抗體。
6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的肽片段是長度為10個氨基酸、高親水性、高抗原性、非信號肽、非跨膜區并且位于無序區域的肽。
7.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的接頭具有弱免疫原性。
8.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的串聯多肽免疫原的氨基酸序列如SEQ?ID?NO?2所示。
9.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所使用的佐劑選自：弗氏完全佐劑、鋁、CpG、或其任意組合。
10.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述多位點免疫在以下位點中至少2個位點進行：頸背部、尾根、后足掌、后側腹股溝、前腿腋窩、后腿肌肉。
11.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的篩選包括利用有限稀釋法亞克隆和ELISA檢測。
12.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的篩選包括通過Western?blot?和細胞免疫熒光進行特異性驗證所得抗體。
13.權利要求1-3中任意一種抗人PRRT2單克隆抗體的應用，其特征在于，所述的抗人PRRT2單克隆抗體能夠特異性識別PRRT2蛋白。
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