[發(fā)明專利]防治香料煙鐮刀型枯萎病的生防菌株NKY122及其生防菌劑

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310293558.9
• 申請日: 2013-07-12
• 公開（公告）號: CN103409343A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發(fā)明（設計）人: 張晨東;孔垂思;肖植文;余磊;邱學禮;楊謹;付斌;余小芬;趙建榮;蘇源;陸自芹
• 申請（專利權）人: 云南省煙草農業(yè)科學研究院;云南省農業(yè)科學院;昆明學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/125
• 代理公司: 昆明今威專利商標代理有限公司 53115
• 代理人: 楊宏珍

1.一種防治香料煙鐮刀型枯萎病的生防菌株NKY122，為枯草芽孢桿菌?(Bacillus?subtilis?)，2013年6月15日保藏于中國微生物菌種保藏委員會普通微生物中心，保藏號：CGMCC?NO.7722。

2.用權利要求1所述的生防菌株NKY122制備的防治香料煙鐮刀型枯萎病的生防菌劑，其特征在于該生防菌劑經如下步驟得到：

a.?將菌株NKY122移植到試管中進行一環(huán)活化，35℃?培養(yǎng)48小時；試管中的NA固體培養(yǎng)基配方為：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化鈉5.0g，瓊脂15.0g，蒸餾水1L，PH值7.3；

b.?取一環(huán)活化后的菌苔移入用1000ml三角瓶裝的800ml配方為：每升含蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，氯化鈉5.0g，蒸餾水1L，PH值7.3的NA培養(yǎng)液中，在150轉/min、35?℃下培養(yǎng)48小時，獲得一級發(fā)酵菌液；

c.?將一級發(fā)酵菌液按接種量1：200培的比例接種于種子罐中與b步驟相同的NA培養(yǎng)液中發(fā)酵培養(yǎng)，種子罐的溫度35～37℃，發(fā)酵48小時后，獲得二級發(fā)酵用菌種液；

d.?將二級發(fā)酵用菌種液按接種量1：20倍的比例接種于發(fā)酵罐中與b步驟相同的NA培養(yǎng)液中發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵罐的溫度為35～37℃，發(fā)酵96小時，當發(fā)酵罐中的發(fā)酵液中芽孢含量大于或等于90%，酸堿度為6.5～7.5時，儲存作為生防菌液；

e.?將生防菌液2000rpm離心5?min，取離心后的菌體與專用保藏液配成活性菌劑，使成品中活菌總濃度為1×10¹¹～1×10^12?CFU/ml；菌體專用保藏液重量百分比配方為：硅酸鎂鋁?0.5%，黃原膠?0.12%，尿素?3%，SP-2728梳型高分子分散劑2.3%，蒸餾水94.08%。