[發明專利]一種利拉魯肽的合成方法

有效

• 申請號: 201310292186.8
• 申請日: 2013-07-12
• 公開（公告）號: CN103304660A
• 公開（公告）日: 2013-09-18
• 發明（設計）人: 陸冬冬;宮小靜;張國慶;白俊才
• 申請（專利權）人: 上海昂博生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/605
• 分類號: C07K14/605;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/02
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 張睿

1.一種利拉魯肽的合成方法，所述方法包括步驟：

（1）以Fmoc-Gly-固相合成樹脂為起始原料，按照固相合成方法重復進行脫保護基、使用縮合劑進行接肽反應的步驟，依次連接帶有保護基的保護氨基酸或保護多肽，切肽得到N末端帶有保護基的利拉魯肽前體；

（2）將N末端帶有保護基的利拉魯肽前體和十六烷基-N-羥基琥珀酰亞胺酯、十六烷酸活化酯或十六烷酸酸酐在液相中進行化學合成，再脫除N末端保護基團，得到目標多肽利拉魯肽。

2.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于,所述目標多肽由利拉魯肽前體和十六烷基-N-羥基琥珀酰亞胺酯、十六烷酸活化酯或十六烷酸酸酐與縮合試劑原位活化而得，所述縮合試劑選自DCC,DIC,HBTU或TBTU。

3.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于,所述N末端帶有的保護基選自2-Cl-芐氧羰基(即稱Cl-Z保護基團)、芐氧羰基(即稱Z保護基團)或芴甲氧羰基(即稱Fmoc保護基團)；

采用鈀炭或金屬催化劑氫化脫除Cl-Z保護基團和Z保護基團；

采用堿溶液水解脫除Fmoc保護基團。

4.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于,20位氨基酸為Fmoc-Lys(γ-Glu-OtBu)，N末端氨基酸采用Cl-Z-His(Trt)-OH,Z-His(Trt)-OH,Alloc-His(Trt)-OH或Fmoc-His(Trt)-OH活化酯方法縮合，得到保護的三十一肽樹脂，同步使用脫保護劑劑進行脫側鏈保護基及切肽，獲得N末端用Cl-Z、Z、Alloc或Fmoc保護的利拉魯肽前體。

5.如權利要求4所述的合成方法，其特征在于,20位氨基酸為Fmoc-Lys(Alloc)-OH，Alloc保護基用四苯基磷鈀氫化脫除后，與Boc-γ-Glu-OtBu反應，20位氨基酸為Fmoc-Lys(Boc-γ-Glu-OtBu)。

6.如權利要求4所述的合成方法，其特征在于，20位氨基酸為Fmoc-Lys(Dde)-OH，Dde保護基用2%水合肼/DMF脫除后，與Boc-γ-Glu-OtBu反應，20位氨基酸為Fmoc-Lys(Boc-γ-Glu-OtBu)。

7.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于，20位氨基酸為Fmoc-Lys(Boc)-OH，N末端氨基酸采用Cl-Z-His(Trt)-OH、Z-His(Trt)-OH、Alloc-His(Trt)-OH或Fmoc-His(Trt)-OH活化酯方法縮合而得，從而得到保護的三十一肽樹脂，同步進行脫側鏈保護基及切肽，獲得N末端用Cl-Z、Z、Alloc或Fmoc保護的利拉魯肽前體(Lys20側鏈不含γ-Glu基團)。

8.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于,將N末端-芴甲氧羰基（Fmoc保護基團）保護的利拉魯肽前體(Lys20側鏈不含γ-Glu基團)和N^α-Oxohexadecyl-Glu(OSu)-OBzl(即為Pal-Glu(OSu)-OBzl)液相中進行酰化反應得到保護的利拉魯肽；將Fmoc保護基用堿脫除，氫化脫除芐基(Bzl)；

堿溶液選自哌啶或DBU堿溶液；

氫化采用鈀炭催化劑催化。

9.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于,將N末端-2-氯芐氧羰基(Cl-Z保護基團)保護的利拉魯肽前體(Lys20側鏈不含γ-Glu基團)和Pal-Glu(OSu)-OBzl進行酰化反應得到保護的利拉魯肽；氫化反應脫除Cl-Z保護及芐基；

氫化采用鈀炭催化劑催化。

10.如權利要求1所述的合成方法，其特征在于,將N末端-芐氧羰基(Z保護基團)保護的利拉魯肽前體(Lys20側鏈不含γ-Glu基團)和Pal-Glu(OSu)-OBzl液相中進行酰化反應得到保護的利拉魯肽；再氫化反應脫除Z保護及芐基；

氫化采用鈀炭催化試劑催化。