[發(fā)明專(zhuān)利]板藍(lán)根藥材的檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310291761.2
• 申請(qǐng)日: 2013-07-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104280493A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-01-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張慧曄;徐小飛;李楚源;王德勤
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 廣州白云山和記黃埔中藥有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/88
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 廣州華進(jìn)聯(lián)合專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 鄭彤;郭元杰

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及化學(xué)分析檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種板藍(lán)根藥材的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

板藍(lán)根為我國(guó)傳統(tǒng)中藥，歷代本草均有記載，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，2010年版《中國(guó)藥典》一部收載為十字花科植物菘藍(lán)IsatisindigoticaFort.的干燥根；主產(chǎn)于安徽、河北、甘肅、河南、黑龍江等省。板藍(lán)根具有清熱，解毒，涼血，利咽之功效；臨床用于治療流行性感冒、高熱頭痛、瘟毒發(fā)斑、大頭瘟疫、爛喉丹疼、療腮、喉痹、瘡腫、水痘麻疹、肝炎等，其主要藥理作用有抗腫瘤、抑菌消炎、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)等，是清熱解毒類(lèi)中藥的代表藥物之一。板藍(lán)根化學(xué)成分復(fù)雜，主要成分有靛藍(lán)、靛玉紅、喹唑酮酸、棕櫚酸、苯甲酸、水楊酸、脯氨酸、精氨酸、腺苷、尿苷、尿嘌呤、鳥(niǎo)嘌呤和次黃嘌呤等等，其中的核苷類(lèi)成分具有抗毒、解熱和活血等作用。以多種成分評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量，有利于表征中藥化學(xué)成分的整體性和復(fù)雜性。

然而，多成分的含量測(cè)定所用對(duì)照品較多，時(shí)間和金錢(qián)成本較高。

2010版《中國(guó)藥典》中以表告依春為板藍(lán)根的含測(cè)指標(biāo)。研究表明表告依春并不穩(wěn)定，受光照、溫度影響較大，并不能完全準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)板藍(lán)根藥材的質(zhì)量。而且中藥成分較為復(fù)雜，用1～2種化學(xué)成分評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量的模示，并不能表征中藥化學(xué)成分的整體性和復(fù)雜性，不能有效地評(píng)價(jià)中藥的質(zhì)量。

現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道的板藍(lán)根中核苷類(lèi)成分的含量測(cè)定方法，所選用的指標(biāo)成分有的比較單一，如腺苷；有的雖采用了多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)，但仍不夠全面，而且采用這些方法所用對(duì)照品較多，成本較高，有些對(duì)照品并不穩(wěn)定，不易制備和測(cè)定。

目前，在采用多指標(biāo)評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量的研究中，大多采用多種方法分別測(cè)定或者采用一種色譜條件不同檢測(cè)波長(zhǎng)的方法測(cè)定相應(yīng)指標(biāo)成分，這種方法耗時(shí)、耗材、耗力。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，本發(fā)明的目的是提供一種板藍(lán)根藥材的檢測(cè)方法。

具體的技術(shù)方案如下：

一種板藍(lán)根藥材的檢測(cè)方法，包括如下步驟：

（1）確定相對(duì)校正因子

①制備含胞苷、尿苷、鳥(niǎo)苷、腺苷和（R,S）-告依春的混合對(duì)照品溶液；

②采用高效液相色譜法分析上述混合對(duì)照品溶液，色譜條件：色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，采用梯度洗脫，流動(dòng)相A為水，流動(dòng)相B為甲醇，0-20min，流動(dòng)相A與流動(dòng)相B的體積比為94:6-95:5；20-60min，流動(dòng)相A與流動(dòng)相B的體積比為由94:6-95:5變化至80:20；流速為0.4-0.7ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為240-260nm，柱溫25-35℃；

③根據(jù)步驟②檢測(cè)得到的結(jié)果計(jì)算相對(duì)校正因子

fkm=fkfm=Wk×AmWm×Ak]]>

其中f_km—相對(duì)校正因子

W_k—參照成分的濃度

A_k—參照成分的峰面積

W_m—其他成分的濃度

A_m—其他成分的峰面積

所述參照成分為胞苷、尿苷、鳥(niǎo)苷或腺苷；

（2）制備參照成分的對(duì)照品溶液；

（3）制備板藍(lán)根藥材的供試品溶液；

（4）采用高效液相色譜法分析步驟（2）的對(duì)照品溶液和（3）的供試品溶液，得參照成分的含量，其中色譜條件與步驟②相同；

（5）根據(jù)下式計(jì)算其他成分的含量