[發明專利]腫瘤靶向性光敏劑及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201310291691.0
• 申請日: 2013-07-11
• 公開（公告）號: CN103330938A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 舒春英;甄明明;王春儒
• 申請（專利權）人: 中國科學院化學研究所
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K49/00;A61K47/48;A61P35/00;A61P15/14
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及兩種腫瘤靶向性光敏劑及其制備方法與應用。

背景技術

近年來癌癥的發病率和死亡率均呈上升趨勢，嚴重地威脅著人類的健康。到目前為止，尚沒有有效的方法遏制癌癥的發生發展，尋找新型有效的癌癥的診斷與治療方法尤為迫切。光動力治療（Photodynamic?Therapy，PDT）是近二十年來新興的一種治療惡性腫瘤的新療法，與傳統的治療手段手術、放療和化療相比，其顯著的優勢在于，可以選擇性的給靶組織實施光照，因光敏劑僅在光照范圍內有效，從而減少對正常組織的損傷，從而達到物理靶向治療的目的。光動力療法的三要素是光敏劑、光源以及氧氣。光敏劑通過靜脈注射，經血液循環會在腫瘤部位聚集（新生血管豐富），在冷光源（非熱能激光）照射下，在氧氣參與下可以產生具有殺傷作用的活性氧物質，能夠破壞蛋白質、核酸等生物大分子，從而達到殺死腫瘤細胞的目的。光敏劑是光動力治療中的核心組成部分，用于光動力治療的理想光敏劑應具備以下特性：1）在光療窗口600-800nm有較強的吸收；2）高的單線態氧產率；3）光毒性強而暗度性低；4）具有一定的腫瘤靶向性；5）組分確定；6）具有熒光特性，可以進行腫瘤的定位與早期診斷。到目前為止，已經開發出的光敏劑主要是基于卟啉/酞菁類的物質，可用于多類癌癥的治療。但是，這些光敏劑尚存在不足之處，如第一代光敏劑血卟啉衍生物和二血卟啉酯等，摩爾吸光率較低，不能充分地將光轉換為細胞毒性物質；第二代光敏劑包括5-氨基酮戊酸(5-ALA)和初卟啉錫(SnEtz)等雖克服了這一缺點，但是這些光敏劑在腫瘤細胞中的富集效果有一定的局限性，提高光敏劑在腫瘤組織的含量是提高光動力療效的重要策略。

發明內容

本發明的目的是提供一種腫瘤靶向性光敏劑HSA-(PpIX)₂及其制備方法。

本發明所提供的腫瘤靶向性光敏劑HSA-(PpIX)₂是由人血清白蛋白（HSA）和光敏劑原卟啉IX(PpIX)通過酰胺鍵偶聯反應制備得到的；其中，HSA與PpIX的偶聯比為1：2。

所述腫瘤靶向性光敏劑HSA-(PpIX)₂的制備方法，具體包括下述步驟：將HSA溶于pH值為7.0-7.4（優選pH值為7.4）的PBS緩沖液中，分批加入過量的PpIX的DMSO溶液，并用堿調節pH值至7-7.4，進行反應，得到含所述HSA-(PpIX)₂的溶液。

其中，所述HSA與PpIX的摩爾比例為HSA:PpIX=1:20-1:50。

所述堿可由0.1M?NaOH溶液提供。

所述反應的反應溫度為室溫，反應時間為4-8h。

為了得到純化的HSA-(PpIX)₂，所述方法還包括如下步驟：將得到的含HSA-(PpIX)₂的溶液使用MW=12,000-14,000透析袋透析除去小分子，最后用葡聚糖凝膠Sephadex?G-25進行分離純化，得到純化的HSA-(PpIX)₂溶液；其中，分離純化所采用的洗脫液為：pH=5.5-6.5且濃度為0.1-0.5M的CH₃COONa溶液。

上述分離純化的過程，在365nm處使用紫外可見分光光度計實時監控透析液中PpIX的吸收光譜，確保純化徹底。

本發明還可對上述腫瘤靶向性光敏劑HSA-(PpIX)₂進一步負載富勒烯羧酸衍生物，得到一種新型的腫瘤靶向性光敏劑，用于調節活性氧的產生和提高光敏劑的穩定性。

所述新型腫瘤靶向性光敏劑由HSA-(PpIX)₂與富勒烯羧酸衍生物通過酰胺鍵偶聯反應制備得到；所述富勒烯羧酸衍生物的分子表達式為C₆₀[C(COOH)₂]_x，其中，x=2-4；所述HSA-(PpIX)₂與富勒烯羧酸衍生物的偶聯比為1：1。

所述新型腫瘤靶向性光敏劑的制備方法，具體包括下述步驟：

a）將富勒烯羧酸衍生物溶于MES（2-(N-嗎啉基）乙磺酸）緩沖液中，加入EDC·HCl（1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽）和NHS（N-羥基琥珀酰亞胺），室溫下反應，得到富勒烯羧酸活性酯溶液；

b）將HSA-(PpIX)₂加入到所述富勒烯羧酸活性酯溶液中攪拌反應，即得到含所述新型腫瘤靶向性光敏劑的溶液。