[發(fā)明專利]雙重特異性蛋白激酶作為肝癌預(yù)后的生物標(biāo)記物的用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310291071.7
• 申請日: 2013-07-11
• 公開（公告）號(hào): CN103364549A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙海濤;趙屹;蔣澄宇
• 申請（專利權(quán)）人: 趙海濤
• 主分類號(hào): G01N33/573
• 分類號(hào): G01N33/573;C12Q1/68;C12Q1/48
• 代理公司: 北京戈程知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉;韓文華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及肝癌細(xì)胞標(biāo)記物的領(lǐng)域。特別地，本發(fā)明涉及雙重特異性蛋白激酶TTK（dual-specificity?protein?kinase，TTK）作為肝癌預(yù)后標(biāo)記物中的用途。

背景技術(shù)

肝癌是一種惡性度高、預(yù)后差的常見腫瘤，各種治療后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的幾率高達(dá)50％以上。如何早期預(yù)測肝癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。已有一些可能能夠用來指示肝細(xì)胞癌患者預(yù)后的指標(biāo)。這些指標(biāo)有些是從外周血里檢測，有些則是從手術(shù)切除的腫瘤組織中獲取。其大都是一些核酸（如microRNA等）和蛋白質(zhì)。以下舉一些實(shí)例：通過搜索文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)一些蛋白在肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展中起作用。作者選取其中一個(gè)并加以研究。檢測一些肝細(xì)胞癌患者的肝癌組織和癌旁組織發(fā)現(xiàn)激活的增強(qiáng)結(jié)合蛋白4(AP-4)和AP-4mRNA相對于癌旁組織在肝癌組織中高表達(dá)，并且通過較大量的腫瘤組織的免疫組化得出其余患者的預(yù)后相關(guān)，表達(dá)高者組5年生存率為33.3%表達(dá)相對低著5年生存率為67.3%，參見Hu,B.S.等人High?expression?of?AP-4predicts?poor?prognosis?for?hepatocellular?carcinoma?after?curative?hepatectomy.Tumour?biology:the?journal?of?the?International?Society?for?Oncodevelopmental?Biology?and?Medicine34,271-276,doi:10.1007/s13277-012-0547-4。肝細(xì)胞癌患者術(shù)后一周外周血中AFP?mRNA的表達(dá)也可以作為預(yù)測術(shù)后復(fù)發(fā)較好的指標(biāo)，參見，<Role?of?AFP?mRNA?expression?in?peripheral?blood?as?a?predictor.pdf>以及通過對比肝癌組織和癌旁組織miRNA-221的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，其表達(dá)與肝細(xì)胞癌患者的復(fù)發(fā)相關(guān)，高表達(dá)組的無復(fù)發(fā)生存時(shí)間相對低表達(dá)組短，參見，Gramantieri,L.等人.MicroRNA-221targets?Bmf?in?hepatocellular?carcinoma?and?correlates?with?tumor?multifocality.Clin?Cancer?Res15,5073-5081,doi:10.1158/1078-0432.CCR-09-0092。

如之前所報(bào)道的，很多和預(yù)后有關(guān)的指標(biāo)在不同的研究中得出的結(jié)果不盡相同，產(chǎn)生偏倚的可能原因是大部分此類研究都是回顧性研究，不同病因的肝細(xì)胞癌和不同人群發(fā)生的肝細(xì)胞癌其中的分子機(jī)制可能不同，例如參見，Singhal,A.,Jayaraman,M.,Dhanasekaran,D.N.&Kohli,V.Molecular?and?serum?markers?in?hepatocellular?carcinoma:predictive?tools?for?prognosis?and?recurrence.Crit?Rev?Oncol?Hematol82,116-140,doi:10.1016/j.critrevonc.2011.05.005(2012).　由于大多數(shù)研究都是回顧性研究，此類marker(指標(biāo))還需要進(jìn)行前瞻性臨床試驗(yàn)區(qū)證實(shí)它的作用。之前并沒有出現(xiàn)做過大規(guī)模前瞻性臨床試驗(yàn)的與預(yù)后相關(guān)的標(biāo)記物的出現(xiàn)。

雙特異性蛋白激酶TTK（dual-specificity?protein?kinase，TTK）具有磷酸化酪氨酸，絲氨酸和蘇氨酸的能力。在有絲分裂過程中該蛋白對在中心體的染色體排列具有重要的作用，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該蛋白對于有絲分裂期間染色體的正確分離具有關(guān)鍵性的作用。當(dāng)該蛋白不能降解，且產(chǎn)生過多的導(dǎo)致異常有絲分裂紡錘體的中心體時(shí)，會(huì)發(fā)生癌癥。不同的剪接導(dǎo)致兩個(gè)轉(zhuǎn)錄變異體，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1或3所示。編碼其的核苷酸序列參見NM_003318.4（SEQ?ID?NO：2）和NM_001166691.1（SEQ?ID?NO：4）。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的發(fā)明人利用兩個(gè)影響學(xué)診斷肝臟多發(fā)占位的病人的模型進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)雙特異性蛋白激酶（TTK）的表達(dá)與肝癌預(yù)后相關(guān)。而在這之前甚至沒有報(bào)道TTK和肝細(xì)胞癌相關(guān)。

本發(fā)明提供了一種選擇性結(jié)合至雙重特異性蛋白激酶蛋白，或結(jié)合至所述蛋白激酶的核酸分子的結(jié)合部分，在制備用于鑒定肝癌患者預(yù)后的試劑中的用途。