[發明專利]乳制品中植物甾醇的定量檢測方法

有效

• 申請號: 201310289363.7
• 申請日: 2013-07-10
• 公開（公告）號: CN104280467A
• 公開（公告）日: 2015-01-14
• 發明（設計）人: 王青云;王利;楊曉波;齊懿鳴;孫健
• 申請（專利權）人: 黑龍江省完達山乳業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/88
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛

1.乳制品中植物甾醇的定量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）樣品的處理：向0.1-1.5克樣品中加入0.667g/mL氫氧化鉀溶液5-10mL和95%乙醇5-30mL，搖動使樣品溶解，于70-100℃皂化1-4h；然后加入有機溶劑萃取2-3次，合并有機相，用蒸餾水洗滌至中性；然后用無水硫酸鈉脫水后，用旋轉蒸發器蒸發至干，用正已烷分次將其轉入10mL容量瓶中定容，即得試樣；所述有機溶劑為正已烷、石油醚或乙醚；

2）標準溶液的配制：標準儲備液的濃度為1.0mg/mL，標準工作液的濃度為50μg/mL；

3）色譜分析：采用規格為30m×0.25mm×0.25μm的毛細管色譜柱Elite-1、規格為30m×0.32mm×0.25μm的毛細管色譜柱Elite-5或規格為30m×0.25mm×0.25μm的毛細管色譜柱Elite-35；

色譜條件：進樣口溫度270-320℃；檢測器溫度270-310℃；程序升溫180-290℃；載氣為氮氣，流速2mL/min；氫氣流速40-45mL/min；空氣流速400-450mL/min；進樣量2μL；分流比10:1；

4）標準曲線的繪制：將植物甾醇標準溶液進樣后，以標樣濃度對峰面積作標準曲線；

5）試樣中植物甾醇含量的測定：將試樣進樣，根據樣品的峰面積，代入公式（I），計算得出試樣中植物甾醇的含量；

Xi=Ai×c×V×100As×m×1000]]>????（I）

式中：

X_i——試樣中植物甾醇的含量；

A_i——試樣中植物甾醇的峰面積；

A_S——植物甾醇標準工作液的峰面積；

c——植物甾醇標準工作液濃度；

V——試樣的定容體積；

m——試樣的質量。

2.根據權利要求1所述的定量檢測方法，其特征在于，所述植物甾醇為β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇中的一種或多種。

3.根據權利要求1所述的定量檢測方法，其特征在于，步驟1）中樣品處理為：向0.2-1.2克樣品中加入0.667g/mL氫氧化鉀溶液5-8mL和95%乙醇10-20mL，搖動使樣品溶解，于80-100℃皂化1-3h；然后加入正已烷萃取2-3次。

4.根據權利要求1所述的定量檢測方法，其特征在于，步驟1）中樣品處理為：向0.3-1.0克樣品中加入0.667g/mL氫氧化鉀溶液6-9mL和95%乙醇15-25mL，搖動使樣品溶解，于70-100℃皂化1-4h；然后加入石油醚萃取2-3次。

5.根據權利要求1所述的定量檢測方法，其特征在于，步驟3）中采用規格為30m×0.25mm×0.25μm的毛細管色譜柱Elite-1進行色譜分析；色譜條件：進樣口溫度300℃；檢測器溫度300℃；程序升溫：210℃保持1min，15℃/min升至285℃，保持6min。載氣為氮氣，流速2mL/min；氫氣流速40mL/min；空氣流速400mL/min；進樣量2μL；分流比10:1。

6.根據權利要求1所述的定量檢測方法，其特征在于，步驟3）中采用規格為30m×0.32mm×0.25μm的毛細管色譜柱Elite-5進行色譜分析；色譜條件：進樣口溫度310℃；檢測器溫度300℃；程序升溫：210℃保持1min，15℃/min升至285℃，保持6min。載氣為氮氣，流速2mL/min；氫氣流速45mL/min；空氣流速450mL/min；進樣量2μL；分流比10:1。

7.根據權利要求1所述的定量檢測方法，其特征在于，步驟3）中采用規格為30m×0.25mm×0.25μm的毛細管色譜柱Elite-35進行色譜分析；色譜條件：進樣口溫度310℃；檢測器溫度300℃；程序升溫：210℃保持1min，15℃/min升至285℃，保持14min。載氣為氮氣，流速2mL/min；氫氣流速45mL/min；空氣流速450mL/min；進樣量2μL；分流比10:1。