[發明專利]一種含有堿性成纖維細胞生長因子活性多肽的植物油體護膚乳液

有效

• 申請號: 201310287142.6
• 申請日: 2013-07-10
• 公開（公告）號: CN103333915A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 李海燕;李校堃;楊晶;王法微;杜林娜;官麗莉;金立波;姜潮;郭詠昕;董圓圓;王南;王艷芳;劉秀明;姚娜
• 申請（專利權）人: 吉林農業大學;吉林農大生物反應器工程有限公司
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;A01H5/10;A61K8/92;A61K8/64;A61Q19/00
• 代理公司: 長春市東師專利事務所 22202
• 代理人: 張鐵生

1.一種表達載體質粒pOBT-bFGF，它是由下述方法制備的：

1）以p1301為基本骨架，將其T-DNA區進行改造，除了保留有T-DNA區的NOS基因外其余基因均被35S和Bar基因替換，以pEGAD質粒為模板，利用35S-F上游引物CGGGGTACCATCCGTCAACATGGTGGAGCACGACACGCTTGTCTACT和Bar-R下游引物CGGAATTCACTAGTTCAGATCTCGGTGACGGGCAGGACCGGACGGGGCGGAACC進行PCR，擴增得到35S-Bar基因，利用kpnI和SpeI酶切位點將其插入到pCAMBIA1301載體T-DNA區的NOS基因前，構建了p1301-35S-Bar-NOS基本質粒，簡寫為pO質粒；

2）用pstI和NcoI分別酶切并連接pO質粒和序列表SEQ?ID?NO.2所示基因，得中間載體pOB；

3）用HindⅢ和kpnI分別酶切并連接中間載體pOB和序列表SEQ?ID?NO.3所示基因，得植物特異表達載體pOBT；

4）用NcoI與HindⅢ分別酶切并連接植物特異表達載體pOBT和序列表SEQ?ID?NO.5所示基因，得表達載體質粒pOBT-bFGF。

2.一種含有堿性成纖維細胞生長因子活性多肽的植物油體，它是將其堿基序列如序列表SEQ?ID?NO.5所示的基因插入植物表達載體中，獲得的表達載體質粒，轉化至油料作物中，收獲種子提取油體。

3.根據權利要求2所述的一種含有堿性成纖維細胞生長因子活性多肽的植物油體，其特征在于：所述的表達載體質粒為權利要求1所述的一種表達載體質粒pOBT-bFGF。

4.根據權利要求3所述的一種含有堿性成纖維細胞生長因子活性多肽的植物油體，其特征在于：所述的油料作物為擬南芥。

5.一種含有堿性成纖維細胞生長因子活性多肽的護膚乳液，它是由下述組份的重量百分比組成：5%-25%紅花油體，10%甘油，10%-25%羧乙基纖維素，1.5%-6%PEG600，0.05%-0.5%防腐劑，1%-10%含有堿性成纖維細胞生長因子蛋白的擬南芥油體和5%-20%維生素C，余量為去離子水。

6.根據權利要求5所述的一種含有堿性成纖維細胞生長因子活性多肽的護膚乳液，其特征在于：?10%紅花油體，10%甘油，10%羧乙基纖維素，3%?PEG600，0.25%防腐劑，?4%含有堿性成纖維細胞生長因子蛋白的擬南芥油體，5%維生素C。

7.根據權利要求5或6所述的一種含有堿性成纖維細胞生長因子活性多肽的護膚乳液，其特征在于：所述的防腐劑為尼泊金甲酯和尼泊金丙酯混合液。

8.一種含有堿性成纖維細胞生長因子活性多肽的植物油體護膚乳液的制備方法，包括以下步驟：按權利要求5所述的一種含有堿性成纖維細胞生長因子活性多肽的護膚乳液配比，首先將將水加入到紅花油體中，混合均勻；然后逐級加入甘油和乳化劑羧乙基纖維素，偶合劑PEG600，攪拌均勻，高剪切在1000rpm-30000rpm下乳化，在均質機中乳化10-20min；攪拌均勻后再加入防腐劑、一種含有堿性成纖維細胞生長因子活性多肽的植物油體和維生素C，攪拌均勻。