[發明專利]白首烏磷脂的酪氨酸酶抑制活性及其用途

無效

• 申請號: 201310286548.2
• 申請日: 2013-07-10
• 公開（公告）號: CN103315300A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 王曉嵐;姚文杰
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: A23L1/29
• 分類號: A23L1/29;A23L1/272;A61K8/97;A61Q19/02;A61Q19/00;A61Q17/04
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技術領域

本發明涉及一種白首烏磷脂的酪氨酸酶抑制活性及其用途。本發明涉及從中藥白首烏中提取、分離得到的總磷脂具有抑制酪氨酸酶的活性，闡明了其制備方法及其食品、日用化工領域的新用途。

背景技術

酪氨酸酶是一種含銅的多酚氧化酶，它是生物體黑素合成過程中的限速酶，催化酪氨酸羥化為多巴、多巴氧化為多巴醌以及5，6-二羥基吲哚(DHI)氧化為5，6-吲哚醌三個步驟。其表達和活性決定著黑色素生成的量和速度。反應過強可引起黑素過多癥，如雀斑、黃褐斑等，黑色素生成過多是黃褐斑形成的根本原因；反應過弱或缺乏反應，則可引發白發、白癜風等。它的活性決定著黑色素的合成及合成量的多少，控制其活力即可控制黑色素的生成量，從而治療色素沉著性疾病或在化妝品領域用于皮膚防曬、增白、祛斑。另外，食品加工與儲藏過程中經常會發生酶促褐變等變色現象，引起褐變的酶主要就是酪氨酸酶，絕大多數褐變影響食品加工與儲藏的效果和質量的穩定，盡可能降低酪氨酸酶的活性有助于改善食品褐變現象。

白首烏來源于蘿摩科鵝絨藤屬3種植物【分別為耳葉牛皮消(Cynanchum?auriculatum?Royle?ex?Wight)、戟葉牛皮消(Cynanchum?bungei?Decne)和隔山消(Cynanchum?wifordii?Hemsl)】的塊根，是臨床常用的補益和抗衰老中藥，自古以來就被視為攝生防老、益精養顏的珍品。現代研究發現白首烏中含有多種活性成分，如C₂₁甾苷、多糖、磷脂等。研究報道白首烏總磷脂可促進家兔耳毛生長【吳秉芹，傅驥遠，龔樹生，等.白首烏總磷脂促進家兔耳毛生長的研究[J].中國醫藥學報，1987，2(3)：29-31.】，公開號為CN1876003A的專利申請“白首烏有效部位的制備方法及其在治療失眠藥物中的用途”公開了白首烏磷脂和白首烏多糖的提取工藝及其在治療失眠藥物和治療或改善失眠的食品中的用途，但目前尚無白首烏藥材中提取的磷脂具有抑制酪氨酸酶的活性及其相關用途的報道。

發明內容

本發明的目的在于：提供一種白首烏總磷脂的新用途。本發明白首烏總磷脂有顯著的酪氨酸酶抑制活性，可用于制備預防皮膚曬黑、增白、祛斑的保健食品及化妝品，也可用于制備護色劑以防止食品褐變。本發明通過以下技術方案實現：

所述白首烏總磷脂是這樣制備的：白首烏粉用Folch試劑(氯仿∶甲醇為2∶1)800mL經回流4h，過濾后濾渣重復提取兩次，提取液濃縮至干，并用適量氯仿溶解，經5倍石油醚沉淀甾體類化合物，離心分離得到的上清液通過減壓濃縮揮干溶劑后，得到總磷脂。

白首烏總磷脂影響酪氨酸酶活力檢測方法：取適量白首烏總磷脂，用溶劑(丙二醇∶乙酸乙酯∶磷酸鹽緩沖液體積比＝9∶1∶18)溶解配制成濃度為1mg/mL(在反應體系的終濃度為0.2mg/mL)的溶液，通過酶促反應檢測其對酪氨酸酶二酚酶活力的影響。取適量氫醌溶于磷酸鹽緩沖液中制得濃度1mg/mL溶液，作為陽性對照溶液。取待測物溶液50μL，并用pH6.8磷酸鹽緩沖液適量稀釋至140μL，與酪氨酸酶液(25U/mL)50μL混合，于37℃孵育5min，加入15mmol/L的左旋多巴溶液60μL，繼續孵育2min，立即于酶標儀492nm處測光吸收值并計算酪氨酸酶抑制率。白首烏總磷脂對酪氨酸酶活力的抑制率為18.6％，而作為陽性對照物氫醌在同樣濃度時的抑制率為69.2％。說明在終濃度為0.2mg/mL時，白首烏總磷脂對酪氨酸酶有一定抑制作用，但抑制作用不及氫醌。

本發明提供的白首烏總磷脂可以作為活性成分，加入食品工業允許添加的成分制備預防皮膚曬黑、增白、祛斑的保健食品，如沖調膏、口服液、軟膠囊、口服片等。

本發明提供的白首烏總磷脂用于制備防曬、增白、祛斑化妝品在配方上沒有特別的限制，可以作為活性成分而制成防曬乳、潤膚霜、按摩霜、面膜、凝膠、身體護理乳液、身體護理油和身體護理精華等。當它作為主要的基質材料用于化妝品時，可以不用添加油脂類材料而起到良好的潤膚效果，同時在皮膚的表面還能形成一層有光澤的保護膜，是一種極其安全的化妝品基質材料。

本發明提供的白首烏總磷脂還可用于制備護色劑以防止食品褐變，護色劑可以是白首烏磷脂的油溶液、油膏，也可以白首烏磷脂為主，添加一些有助于護色的安全無毒害的物質。