[發明專利]白首烏多糖的酪氨酸酶抑制活性及其用途

有效

• 申請號: 201310286547.8
• 申請日: 2013-07-10
• 公開（公告）號: CN103319622A
• 公開（公告）日: 2013-09-25
• 發明（設計）人: 王曉嵐;姚文杰;苑亮
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A23L1/29;A23L1/272;A61K8/73;A61Q19/02;A61Q19/00;A61Q17/04;A61P17/00
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技術領域

本發明涉及一種白首烏多糖的酪氨酸酶抑制活性及其用途。本發明涉及從中藥白首烏中提取、分離得到的總多糖具有抑制酪氨酸酶的活性，闡明了其制備方法及其在醫藥、食品、日用化工領域的新用途。

背景技術

酪氨酸酶是一種含銅的多酚氧化酶，它是生物體黑素合成過程中的限速酶，催化酪氨酸羥化為多巴、多巴氧化為多巴醌以及5，6-二羥基吲哚(DHI)氧化為5，6-吲哚醌三個步驟。其表達和活性決定著黑色素生成的量和速度。反應過強可引起黑素過多癥，如雀斑、黃褐斑等，黑色素生成過多是黃褐斑形成的根本原因；反應過弱或缺乏反應，則可引發白發、白癜風等。它的活性決定著黑色素的合成及合成量的多少，控制其活力即可控制黑色素的生成量，從而治療色素沉著性疾病或在化妝品領域用于皮膚防曬、增白、祛斑。另外，食品加工與儲藏過程中經常會發生酶促褐變等變色現象，引起褐變的酶主要就是酪氨酸酶，絕大多數褐變影響食品加工與儲藏的效果和質量的穩定，盡可能降低酪氨酸酶的活性有助于改善食品褐變現象。

白首烏來源于蘿摩科鵝絨藤屬3種植物【分別為耳葉牛皮消(Cynanchum?auriculatum?Royle?ex?Wight)、戟葉牛皮消(Cynanchum?bungei?Decne)和隔山消(Cynanchum?wifordii?Hemsl)】的塊根，是臨床常用的補益和抗衰老中藥，自古以來就被視為攝生防老、益精養顏的珍品。現代研究發現白首烏中含有多種活性成分，如C₂₁甾苷、多糖、磷脂等。如公開號為CN1583799A的專利申請“白首烏多糖的提取及其口含片制備”公開了白首烏多糖的提取及其口含片的制備技術并指出白首烏多糖具有免疫調節作用，公開號為CN1876003A的專利申請“白首烏有效部位的制備方法及其在治療失眠藥物中的用途”公開了白首烏磷脂和白首烏多糖的提取工藝及其在治療失眠藥物和治療或改善失眠的食品中的用途，公開號為CN102649822A的專利申請“一種從新鮮白首烏中提取多糖的方法”公開了一種從新鮮的白首烏中提取多糖的工藝優化了的方法。但目前尚無白首烏藥材中提取的多糖具有抑制酪氨酸酶的活性及其相關用途的報道。

發明內容

本發明的目的在于：提供一種白首烏總多糖的新用途。本發明白首烏總多糖有顯著的酪氨酸酶抑制活性，可用于制備治療色素沉著性疾病的藥物，也可用于制備預防皮膚曬黑、增白、祛斑的保健食品及化妝品，還可用于制備果蔬護色劑以防止食品褐變。

本發明通過以下技術方案實現：

所述白首烏總多糖是這樣制備的：白首烏粉經多次乙醇提取后，取殘渣風干，然后沸水浸提，提取液用α-淀粉酶、糖化酶去淀粉，用木瓜蛋白酶及Sevag試劑除蛋白，上清液濃縮，加入乙醇沉淀，沉淀物依次用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，真空干燥得白首烏總多糖。

白首烏總多糖影響酪氨酸酶活力檢測方法：取適量白首烏總多糖，用磷酸鹽緩沖液溶解配制成濃度為1mg/mL(在反應體系的終濃度為0.2mg/mL)的溶液，通過酶促反應檢測其對酪氨酸酶二酚酶活力的影響。取適量氫醌溶于磷酸鹽緩沖液中制得濃度1mg/mL溶液，作為陽性對照溶液。取待測物溶液50μL，并用pH6.8磷酸鹽緩沖液適量稀釋至140μL，與酪氨酸酶液(25U/mL)50μL混合，于37℃孵育5min，加入15mmol/L的左旋多巴溶液60μL，繼續孵育2min，立即于酶標儀492nm處測光吸收值并計算酪氨酸酶抑制率。白首烏總多糖對酪氨酸酶活力的抑制率為73.1％，而作為陽性對照物氫醌在同樣濃度時的抑制率為69.2％。說明在終濃度為0.2mg/mL時，白首烏總多糖與氫醌對酪氨酸酶的抑制率相當。

本發明提供的白首烏總多糖可以作為活性成分，可以加入一種或多種藥劑學上可接受的載體，載體包括藥學領域常規的稀釋劑，賦形劑、填充劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、吸收促進劑、吸附載體、潤滑劑、滲透壓調節劑，必要時還可以加入香味劑、甜味劑等，按照藥劑學上記載的制劑的制備方法制成制劑，用于治療色素沉著性疾病如黃褐斑以及其它需要抑制酪氨酸酶活性的疾病。所述的制劑包括注射液、粉針劑、顆粒劑、片劑、沖劑、散劑、口服液、糖衣片劑、薄膜衣片劑、膠囊劑、口含劑、顆粒劑、丸劑、膏劑、丹劑、噴霧劑、滴丸劑、崩解劑、口崩片、微丸、外用溶液劑等。

本發明提供的白首烏總多糖可以作為活性成分，加入食品工業允許添加的成分制備預防皮膚曬黑、增白、祛斑的保健食品，如沖調粉、口服液、膠囊、口服片等。