[發(fā)明專利]一種硼替佐米對(duì)映異構(gòu)體的高效液相色譜分離檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310285899.1
• 申請(qǐng)日: 2013-07-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103344733A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙小偉;蔡繼蘭;吉同琴;陳文明;朱飛;施永濤;宗素艷;任鳳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇奧賽康藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 南京知識(shí)律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 盧亞麗

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物分析檢測(cè)領(lǐng)域，涉及一種硼替佐米對(duì)映異構(gòu)體的高效液相色譜分離檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

硼替佐米，化學(xué)名：[(1R)-3-甲基-1-[[(2S)-1-氧-3-苯基-2-[(吡嗪羧基)氨基]丙基]氨基]丁基]硼酸，外文名(或)通用名：Bortezomib(商品名：萬(wàn)珂)，分子式：C₁₉H₂₅BN₄O₄，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

硼替佐米(Bortezomib)是由美國(guó)Millennium制藥公司研發(fā)的新型抗腫瘤藥物。近年來(lái)研究證實(shí)，硼替佐米作為蛋白酶體抑制劑，可在多種腫瘤細(xì)胞株和癌變細(xì)胞中誘導(dǎo)凋亡，顯著增強(qiáng)某些化療藥物和離子化放療等方法誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的療效，而對(duì)于正常細(xì)胞的毒性作用相對(duì)較小。硼替佐米是一種合成的高選擇性26S硼酸鹽蛋白酶體抑制劑，除多發(fā)性骨髓瘤(Muhiplemyeloma，MM)外，美國(guó)食品藥品管理局(FDA)還于2006年底批準(zhǔn)其在套細(xì)胞淋巴瘤的使用。同時(shí)在其它類型漿細(xì)胞疾病、急性髓系白血病及某些實(shí)體瘤的治療上，硼替米佐也被報(bào)道有令人矚目的療效。因此，硼替佐米正在成為腫瘤治療的重要藥物。

硼替佐米為手性藥物，采用立體專屬性的分析方法嚴(yán)格控制產(chǎn)品的光學(xué)純度，并制定合理可行的對(duì)映異構(gòu)體雜質(zhì)的限度,是硼替佐米質(zhì)量控制的重要部分，對(duì)促進(jìn)其臨床應(yīng)用具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。目前，尚未有準(zhǔn)確靈敏地檢測(cè)硼替佐米中對(duì)映異構(gòu)體含量的有效方法的公開(kāi)。

中國(guó)專利申請(qǐng)CN101531602A（公開(kāi)日2009.09.16）中公開(kāi)了一種HPLC法分析分離酒石酸福莫特羅中間體的方法，其選用纖維素類手性柱OJ-H，以正己烷-無(wú)水乙醇-乙二胺為流動(dòng)相。中國(guó)專利申請(qǐng)CN101464431A（公開(kāi)日2009.06.24）中公開(kāi)了一種HPLC法分析分離米格列奈鈣中間體及其對(duì)映異構(gòu)體的方法，采用環(huán)糊精類手性柱如CYCLOBOND?I2000，以離子對(duì)試劑如四丁基氫氧化銨和磷酸鹽如磷酸氫二鈉/磷酸為流動(dòng)相。CN101042381A（公開(kāi)日2007.09.26）公開(kāi)了一種地舍平的對(duì)映異構(gòu)體的HPLC測(cè)定法，其采用kromasil100-5-DMB為填充劑，以含1%醋酸的二氯甲烷與己烷銨38：62的比例為流動(dòng)相。CN101206201A（公開(kāi)日2008.06.25）公開(kāi)了一種分離測(cè)得氯法拉濱及其對(duì)映異構(gòu)體的HPLC方法，其采用C18色譜柱，以磷酸二氫鉀溶液與乙腈或者磷酸二氫鉀溶液與甲醇為流動(dòng)相。CN101271087A（公開(kāi)日2008.09.24）中公開(kāi)了一種分離測(cè)定地西他濱及其對(duì)映異構(gòu)體的HPLC法，其采用硅膠柱，以正己烷：乙醇：三乙胺=50：50:0.1%為流動(dòng)相。

可見(jiàn)，對(duì)于藥品的對(duì)映異構(gòu)體的分離檢測(cè)，所選用的色譜柱、流動(dòng)相等條件各有差異。色譜條件的選擇是結(jié)合化合物本身性質(zhì)、流動(dòng)相的極性及他們的相互作用等因素，進(jìn)行綜合考量，選擇適合待檢樣品的方法的過(guò)程。不同化合物的HPLC檢測(cè)條件之間并沒(méi)有明確的參考意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種用硼替佐米對(duì)映異構(gòu)體的高效液相色譜分離檢測(cè)方法，該方法靈敏度高、分離度良好、結(jié)果準(zhǔn)確可靠，適合用于硼替佐米及其制劑產(chǎn)品的光學(xué)質(zhì)量控制。

本發(fā)明提供的硼替佐米對(duì)映異構(gòu)體的高效液相色譜分離檢測(cè)方法，采用纖維素類涂覆型手性色譜柱，以正己烷-低級(jí)醇混合溶液-低級(jí)醇胺為流動(dòng)相對(duì)硼替佐米的對(duì)映異構(gòu)體進(jìn)行分離測(cè)定。

所述纖維素類涂覆型手性柱優(yōu)選為OZ-H手性色譜柱。

所述流動(dòng)相優(yōu)選為正己烷-甲醇-乙醇-乙醇胺，其體積比優(yōu)選為88～92：5：3～7：0.8～0.12，更優(yōu)選地為90：5：5：0.1。

優(yōu)選地，在所述分離檢測(cè)方法中，有如下任選的色譜條件：

流動(dòng)相流速為0.8～1.2ml/min，優(yōu)選為1.0ml/min；和/或

色譜柱溫度為30～40℃，優(yōu)選為35℃；和/或

檢測(cè)器采用紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為270nm。

在一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述分離檢測(cè)方法的色譜條件包括：色譜柱為OZ-H手性色譜柱，檢測(cè)器采用紫外檢測(cè)器（UV），流動(dòng)相為正己烷-甲醇-乙醇-乙醇胺(88～92:5:3～7:0.8～0.12)，色譜柱溫度為30～40℃，流速為0.8～1.2ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為250～280nm。