[發(fā)明專利]一種蛋白酶、編碼基因、載體、工程菌及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310282701.4
• 申請日: 2013-07-04
• 公開（公告）號: CN103361332A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 施建軍;施渭堯;黃黎鋒;李海峰;藍(lán)袁洋;王力;李凡
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州佳惠農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司
• 主分類號: C12N9/50
• 分類號: C12N9/50;C12N15/57;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;A23L1/308;A23L1/214
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;冷紅梅

（一）技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種蛋白酶，編碼該酶的基因，含有其編碼基因的重組載體、基因工程菌及其應(yīng)用。

（二）背景技術(shù)

蛋白酶是催化蛋白質(zhì)水解的一類酶。主要存在于動物內(nèi)臟、植物莖葉、果實和微生物中，是最重要的三大工業(yè)用酶之一。蛋白酶是一種重要的工業(yè)用酶，其生幾乎占酶制劑市場的65%以上。蛋白酶種類的多樣性和水解活性的專一性，使其在食品、藥物、皮革、洗滌劑等工業(yè)生產(chǎn)領(lǐng)域成為具有重要商業(yè)價值的工業(yè)酶。已有的研究表明，我國在產(chǎn)蛋白酶優(yōu)良菌株的篩選、發(fā)酵、誘變、工程菌構(gòu)建與表達(dá)、酶的純化與制備等研究技術(shù)發(fā)展迅速，許多蛋白酶品種已大量生產(chǎn)和應(yīng)用，但與國外相比，我國的蛋白酶研究還存高產(chǎn)微生物資源開發(fā)不足、蛋白酶種類較少、作用范圍較窄，酶制劑品種單一，價格昂貴等問題，因此，尋找和開發(fā)高產(chǎn)蛋白酶微生物資源具有重要的科研、應(yīng)用及商業(yè)價值。

（三）發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一種蛋白酶，編碼該酶的基因，含有其編碼基因的重組載體、基因工程菌及其在制備蘆筍膳食纖維中的應(yīng)用。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

一種蛋白酶，其氨基酸序列如SEQ?ID?No.1所示：

1???Met?Lys?Gly?Phe?Leu?Gly?Leu?Ser?Leu?Leu?Pro?Leu?Leu?Ala?Ala?Ala?Ser?Pro?Val?Ile

21??Thr?Glu?Thr?Ile?His?Asn?Asp?Ala?Ala?Pro?Ile?Leu?Ser?Ser?Tyr?Asn?Thr?Glu?Glu?Val

41??Ser?Asp?Ser?Tyr?Met?Ile?Val?Phe?Lys?Lys?His?Val?Asp?Thr?Ala?Leu?Ala?Ala?Gln?His

61??Gln?Met?Trp?Val?Gln?Asp?Leu?His?Ser?Gln?Val?Glu?Ala?Glu?Arg?Ala?Glu?Leu?Lys?Lys

81??Arg?Ser?Gln?Phe?Pro?Ile?Thr?Asp?Asp?Ala?Phe?Lys?Gly?Ile?Lys?His?Thr?Tyr?His?Ile

101?Pro?Gly?Ala?Leu?Met?Gly?Tyr?Ala?Gly?His?Phe?His?Glu?Ser?Val?Val?Glu?Gln?Ile?Arg

121?Arg?His?Pro?Asp?Val?Glu?Tyr?Val?Glu?Lys?Asp?Ser?Val?Val?His?Ala?Met?Glu?Asp?Pro

141?Glu?Ile?Gln?Lys?Asn?Ala?Pro?Trp?Gly?Leu?Ala?Arg?Ile?Ser?His?Arg?Asp?Ala?Leu?Thr

161?Phe?Gly?Thr?Tyr?Asn?Lys?Tyr?Leu?His?Ala?Ala?Asp?Gly?Gly?Glu?Gly?Val?Asp?Val?Tyr

181?Val?Ile?Asp?Thr?Gly?Thr?Asn?Val?Asp?His?Val?Asp?Phe?Glu?Gly?Arg?Ala?His?Trp?Gly

201?Lys?Thr?Ile?Pro?Val?Asp?Asp?Asp?Asp?Ile?Asp?Gly?Asn?Gly?His?Gly?Thr?His?Cys?Ser

221?Gly?Thr?Ile?Ala?Gly?Lys?Lys?Tyr?Gly?Val?Ala?Lys?Lys?Ala?Asn?Val?Tyr?Ala?Ile?Lys

241?Val?Leu?Arg?Ser?Asn?Gly?Ser?Gly?Ser?Met?Ser?Asp?Val?Val?Lys?Gly?Val?Glu?Tyr?Ala

261?Ala?Ala?Glu?His?Thr?Arg?Lys?Val?Asn?Glu?Ala?Lys?Ser?Gly?Lys?Lys?Lys?Gly?Phe?Lys

281?Gly?Ser?Val?Ala?Asn?Met?Ser?Leu?Gly?Gly?Gly?Lys?Ser?Val?Thr?Leu?Asp?Ile?Ala?Val