[發明專利]單珠光子晶體微球液相芯片化學發光法高靈敏度檢測黃曲霉毒素B1的方法

無效

• 申請號: 201310280955.2
• 申請日: 2013-07-04
• 公開（公告）號: CN103344759A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發明（設計）人: 李建林;徐坤;孫越;李瑋;徐杰;蔣云坤;曹斌;鄭鐵松
• 申請（專利權）人: 南京師范大學
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N21/76
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 盧亞麗

1.一種用光子晶體微球液相芯片化學發光法檢測黃曲霉毒素B1的方法，其特征在于，利用單珠光子晶體微球為黃曲霉毒素B1探針載體，在微球表面進行競爭免疫檢測黃曲霉毒素B1，通過樣品中黃曲霉毒素B1與微球表面固定的抗原競爭結合單克隆毒素抗體，利用辣根過氧化物酶標記的二抗與黃曲霉毒素B1抗體特異性結合，利用多功能酶標儀對化學發光信號進行檢測。

2.根據權利要求1所述的方法，包括以下步驟：

（1）光子晶體微球的制備；

（2）光子晶體微球表面的修飾：通過體積比3：7的雙氧水與濃硫酸對步驟（1）得到的微球表面進行羥基化修飾，再用γ-縮水甘油氧丙基三甲氧基硅烷對微球表面進行環氧基修飾；

（3）抗原的固定：通過化學鍵合方法將黃曲霉毒素B1人工抗原固定于經過步驟（2）表面修飾的微球表面；

（4）用單珠光子晶體微球流式芯片對待測樣品進行競爭免疫檢測；利用多功能酶標儀檢測化學發光信號值。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于步驟（2）中γ-縮水甘油氧丙基三甲氧基硅烷微球表面進行環氧基修飾時，120℃下烘干30-60min。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于所述黃曲霉毒素B1人工抗原包被濃度為1200ng/mL，抗體稀釋比率為1：10000，二抗稀釋比率為1：6000。