[發(fā)明專利]紅花中的摻假色素金橙Ⅱ的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310278796.2
• 申請日: 2013-07-04
• 公開（公告）號: CN103364501A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發(fā)明（設計）人: 陳旭;金竹昳;戴小峰;金穎;辛宇;羅聲;吳怡君;強佳麗;崔雯琪
• 申請（專利權）人: 上海大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海上大專利事務所(普通合伙) 31205
• 代理人: 陸聰明

技術領域

????本發(fā)明涉及了一種紅花中的摻假色素金橙Ⅱ的檢測方法。

背景技術

紅花為菊科植物紅花（Carthamustinctorius?L）的干燥花，具有活血化淤、止痛等功效。它對心血管系統(tǒng)有廣泛而顯著的作用，其中查耳酮苷類化合物——羥基紅花黃色素A（HSYA）為其活血化瘀作用的主要有效成分。由于紅花具有確切的臨床療效，因此已大量用于中成藥生產和臨床處方。

但由于紅花價格較高，其存在普遍的摻偽現(xiàn)象。其中最常見的為金橙Ⅱ，又名酸性橙Ⅱ、二號橙、桔黃橙或酸性金黃Ⅱ，俗名金黃粉，化學名為2-萘酚偶氮對苯磺酸鈉，是一種化工染料，主要用于皮革、紡織物染色，禁止作為食品添加劑使用。但其具有色澤鮮艷、著色穩(wěn)定、價廉等特點，一些不法商販將其用于藥材生產與加工，嚴重危害了消費者健康。

目前有關紅花的質量分析方法主要有高效液相色譜法、高效液相色譜-質譜聯(lián)用法，但利用高效液相色譜法僅檢測紅花中金橙Ⅱ的含量會導致過多假陽性樣品的出現(xiàn)，從而大大削弱了檢測的準確性。另外，若采用高效液相色譜-質譜聯(lián)用法，檢測儀器和費用往往比較昂貴,所以此法不能適應更大范圍內各實驗室的檢測條件。據(jù)文獻，未見僅用常規(guī)HPLC法來提高紅花中金橙Ⅱ篩選精確度的報道。本發(fā)明通過高效液相色譜分別測定紅花樣品中金橙Ⅱ和羥基紅花黃色素A的含量，并進行對比篩選分析，有效提高分析結果的準確性且降低檢測成本。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術中存在的問題，提供一種紅花中的摻假色素金橙Ⅱ的檢測方法。

???????一種紅花中的摻假色素金橙Ⅱ的檢測方法，其特征在于該方法的具體步驟為：

a.???????精密稱取紅花樣品粉末，以甲醇浸提得到紅花樣品的提取液，超聲后離心此提取液，得澄清上清液，取該上清液經(jīng)高效液相色譜法測得各樣品中的羥基紅花黃色素A的含量。

b.??????精密稱取紅花樣品粉末，用乙醇浸提得到提取液，超聲后離心此提取液，得澄清上清液；取該上清液經(jīng)高效液相色譜法測得各紅花樣品中金橙Ⅱ的含量。

c.???????將步驟a和步驟b所得結果進行對比，將比值超過千分之二的待測品篩選為含有非法添加色素金橙Ⅱ的陽性樣品。

上述檢測羥基紅花黃色素A含量的高效液相色譜法是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相為甲醇、乙腈和0.01%磷酸溶液（體積比為26:2:72），并用磷酸調節(jié)至pH值為3.0；檢測波長為403nm。

本發(fā)明通過高效液相色譜分別測定紅花樣品中金橙Ⅱ和羥基紅花黃色素A的含量，并進行對比篩選分析，有效提高篩選結果的準確性且降低檢測成本。

本發(fā)明建立的檢測各紅花樣品中的羥基紅花黃色素A含量的方法，是基于《中華人民共和國藥典》2010版測定紅花中羥基紅花黃色素A含量的方法，但作了一些改進，例如《藥典》中使用甲醇-乙腈-0.7％磷酸溶液（體積比為26:2:72）為流動相，本發(fā)明中HPLC的流動相選擇為：甲醇-乙腈-0.01%磷酸溶液（體積比為26:2:72），以磷酸調pH為3.0，色譜柱可采用通用型的ODS柱，且避免了流動相pH值過低易損色譜柱的現(xiàn)象，本發(fā)明中的羥基紅花黃色素A色譜檢測方法具有分離效果好、對色譜柱耐pH?值的要求低、通用性強等特點。

本發(fā)明中檢測紅花中金橙Ⅱ的色譜檢測方法，采用國家食品藥品監(jiān)督管理局《中藥材及中藥飲片藥品補充檢驗方法和檢驗項目批準件》檢測紅花中金橙Ⅱ的色譜分析方法：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.025mol/L-磷酸二氫鉀溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸調pH為3.0）（40:60）；檢測波長為484nm。

本發(fā)明有以下優(yōu)點：?????????????????????????????????????????

①???本發(fā)明中建立檢測紅花樣品中的羥基紅花黃色素A含量方法，具有分離效果好、對色譜柱耐pH?值的要求低、通用性強等特點。

②???本發(fā)明中的對比篩選法，主要是運用HPLC法同時測定了樣品中金橙Ⅱ和羥基紅花黃色素A的含量，經(jīng)比對分析限定了一個合適的比值范圍，若其兩者含量比大于千分之二的紅花樣品確定為摻假色素金橙Ⅱ的陽性樣品。本發(fā)明僅用常規(guī)的HPLC法，大大節(jié)省了檢測成本，比液質聯(lián)用法的適用面更為普及和廣泛。

③???本發(fā)明在篩選紅花中添加金橙Ⅱ的陽性樣品的同時，檢測各樣品中羥基紅花黃色素A的含量，也可作為評定紅花品質的重要依據(jù)之一。