[發(fā)明專利]棉花纖維中苯丙烷類結(jié)構(gòu)單體的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310278533.1
• 申請日: 2013-06-28
• 公開（公告）號: CN103364516A
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡文冉;范玲;李曉東;王玉晶;周小云;孫濤;喬坤云
• 申請（專利權(quán)）人: 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院核技術(shù)生物技術(shù)研究所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種棉花纖維中苯丙烷類結(jié)構(gòu)單體的檢測方法，該方法包括：先采用巰基乙酸法將苯丙烷類化合物從棉花纖維中提取出來，再借助還原降解反應(yīng)(DFRC)進(jìn)行苯丙烷類結(jié)構(gòu)單體的分析；其中巰基乙酸法是指將植物細(xì)胞壁物質(zhì)與巰基乙酸和稀鹽酸混合液煮沸后獲得細(xì)胞壁殘渣，再用NaOH溶液抽提，得到的NaOH提取液用濃鹽酸酸化，產(chǎn)生沉淀，離心后即得棉花纖維中苯丙烷類化合物；DFRC方法是指在乙酰溴乙酸溶液中進(jìn)行衍生化和苯丙烷類化合物溶解，接著發(fā)生在常溫下使醚鍵斷裂的還原反應(yīng)，產(chǎn)物進(jìn)行GC分析。

2.如權(quán)利要求1所述之的檢測方法，其特征在于該方法各步驟為：

(1)巰基乙酸法提取棉花纖維中的苯丙烷類化合物

a.稱取1.0g已清洗去可溶物質(zhì)的棉花纖維，置于30mL血清瓶內(nèi)，加入20mL2N?HCl后再加入3mL巰基乙酸，充分混勻后旋緊瓶蓋，置于98℃水浴鍋內(nèi)輕緩震蕩4h；反應(yīng)完成后取出血清瓶置于冰上冷卻20min，將反應(yīng)液轉(zhuǎn)至50mL離心管，12,000rpm，室溫下離心15min，棄上清，殘渣用20mL蒸餾水清洗3次；

b.向離心管中的殘渣中加入10mL0.5M?NaOH，混勻后室溫下?lián)u動(250rpm)10-12h；隨后12,000rpm，室溫下離心15min，存上清液；

c.重復(fù)步驟b；

d.殘渣再加10mL2M?NaOH，重復(fù)步驟b；

e.將三次上清合并，加入6mL濃HCl，4℃下放置4h；

f.12,000rpm，4℃，離心20min，棄上清；

g.沉淀用10mL蒸餾水清洗2次，干燥后研磨成粉末備用；

(2)苯丙烷類化合物衍生化后的還原降解反應(yīng)(DFRC)

a.乙酰溴衍生和苯丙烷類化合物溶解反應(yīng)：將用巰基乙酸法提取的棉纖維苯丙烷類化合物置于30mL具Teflon內(nèi)墊的血清瓶內(nèi)，加5mL?AcBr∶acetic?acid(20∶80，V/V)溶液，立即蓋緊瓶蓋，放置于水浴鍋內(nèi)，60℃下水浴3h，反應(yīng)完成后將降解溶液轉(zhuǎn)移至10mL稱量瓶內(nèi)，敞口放置在通風(fēng)櫥內(nèi)將溶液快速吹干；

b.還原裂解反應(yīng)：吹干后的殘余物溶解在3mL酸性還原介質(zhì)中，加入約50mg鋅粉，搖床上300rpm下輕緩晃動30min?；旌衔锏谷牒?0mL飽和NH₄Cl和10mL?CH₂Cl₂的分液漏斗中，混勻后用3％HCl調(diào)節(jié)pH至3，CH₂Cl₂萃取2次，萃取液混合后用無水MgSO₄干燥，過濾，減壓蒸發(fā)至干；

c.乙?；^程：殘余物中加1.5mL?CH₂Cl₂、0.2mL吡啶、0.2mL乙酸酐，混勻密封后室溫下乙?；?0min，減壓蒸干，殘余物用無水乙醇清洗至無吡啶味道，蒸干無水乙醇；

d.標(biāo)樣的乙?；簻?zhǔn)確稱取10mg松柏醇、15mg芥子醇分別加入0.5mL吡啶溶解后，再分別加入0.5mL乙酸酐，充分混勻，室溫下放置12-16h，然后分別加入5mL無水乙醇，真空蒸干，反復(fù)用無水乙醇清洗至無吡啶的味道后將乙酰化產(chǎn)物做GC分析的標(biāo)樣；

e.GC分析：殘余物溶解在1mL?CH₂Cl₂中，進(jìn)行GC分析。