[發明專利]狂犬病、破傷風雙效馬抗血清及其制備方法

有效

• 申請號: 201310275949.8
• 申請日: 2013-07-03
• 公開（公告）號: CN103341163A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發明（設計）人: 孫文
• 申請（專利權）人: 孫文
• 主分類號: A61K39/295
• 分類號: A61K39/295;A61K39/205;A61K39/08;A61P31/04;A61P31/14
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 樊戎;徐紹新

1.一種狂犬病、破傷風雙效馬抗血清，其特征在于：它是用狂犬病毒滅活抗原和破傷風類毒素抗原對健康馬匹進行注射免疫并使之產生抗體血清，采血并選取每1ml含抗狂犬病血清效價100~20000國際單位，含抗破傷風血清效價1100~20000國際單位的血漿，用注射用水稀釋2~4倍后進行純化精制制備而成的，所述狂犬病、破傷風雙效馬抗血清中每1ml含抗狂犬病血清效價不少于200國際單位，含抗破傷風血清效價不低于2000國際單位，F(ab’)₂片段的純度不低于60%。

2.一種狂犬病、破傷風雙效馬抗血清的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1）挑選健康馬匹，在0、14天注射狂犬病毒滅活抗原，然后于21天進行破傷風類毒素抗原的初次免疫注射和狂犬病毒滅活抗原的第三針注射，最后于45和60天同時進行狂犬病毒滅活抗原與破傷風類毒素抗原的加強免疫注射，每次注射的狂犬病毒滅活抗原和破傷風類毒素抗原均為5ml，

所述狂犬病毒滅活抗原的效價為15~50IU/ml，其佐劑是液體石蠟與羊毛脂配成的油包水型不完全福氏佐劑，

所述破傷風類毒素抗原的效價為100~500Lf/ml，其佐劑是液體石蠟與羊毛脂配成的油包水型不完全福氏佐劑；

2）免疫完成后的第15天采集血漿，選取每1ml含抗狂犬病血清效價100~20000國際單位，含抗破傷風血清效價1100~20000國際單位的血漿，用注射用水稀釋2~4倍；

3）稀釋后的血漿純化精制，即得。

3.根據權利要求2所述的狂犬病、破傷風雙效馬抗血清的制備方法，其特征在于：所述純化精制的方法包括以下步驟：

1）將稀釋后的血漿調整PH值至3.1~3.7，然后加入胃蛋白酶至胃蛋白酶的終含量為3~12u/g，消化60~120分鐘后加入硫酸銨鹽析、過濾，取沉淀；

2）將沉淀用注射用水完全溶解，按重量加入0.8~1.2%的明礬，調整PH值至7.7~7.9，吸附1小時后過濾，除去明礬，上清液超濾濃縮，向濃縮液中加入注射用水調整蛋白質含量為10~150g/L，并加入氯化鈉、硫柳汞使氯化鈉的濃度為7.5~9.5g/L、硫柳汞的濃度為0.07~0.1g/L，調pH值至6.0~7.0；

3）將步驟2）得到的溶液用0.20微米濾膜除菌過濾，除菌過濾的壓力為0.01~0.15MPa。