[發明專利]黑果枸杞果實提取物及制備方法和應用

有效

• 申請號: 201310274771.5
• 申請日: 2013-07-02
• 公開（公告）號: CN103340983A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發明（設計）人: 譚昌恒;譚俊杰;朱大元;胡宗江
• 申請（專利權）人: 青海玉辰堂生物科技有限公司;中國科學院上海藥物研究所
• 主分類號: A61K36/815
• 分類號: A61K36/815;A61P7/00;A61K131/00
• 代理公司: 上海金盛協力知識產權代理有限公司 31242
• 代理人: 羅大忱

技術領域

本發明涉及一種黑果枸杞果實提取物及其應用，具體涉及黑果枸杞果實提取物在制備治療因細胞毒性藥物（如環磷酰胺）和有毒化學品（如苯）誘導的白細胞降低藥物中的應用。?

背景技術

很多情況可導致人體的白細胞降低，病因可以是繼發性，某些感染例如細菌、病毒等，化學或物理因素例如一定劑量的藥物（抗腫瘤藥物）、有毒化學品(苯)、電離輻射等以及血液病、脾功能亢進，結締組織疾病等，原發性疾病例如某些少見的原發性疾病、遺傳性疾病以及細胞毒性藥物，包括環磷酰胺、白消安、氟尿嘧啶等。此外，許多藥物都可以偶致某些病人患白細胞減少癥，白細胞減少癥的最主要合并癥是造成感染，感染嚴重者可以致死。而一般的白細胞減少癥患者常致疲乏、無力、易感染等。?

目前，為了減輕人體的白細胞降低，目前國內外臨床均廣泛使用粒-單細胞刺激因子（GM-CSF）和粒細胞刺激因子（G-CSF），已證明有肯定療效。但是，由于此二藥物半衰期短，只有2～3h，最好每12h皮下注射1次（口服無效），而且是蛋白多肽藥物，穩定性差，儲存條件嚴格，給病人治療帶來很大的不便。?

黑果枸杞（LyciumruthenicumMurr.）系茄科枸杞屬多年生耐鹽抗旱灌木植物，主要生長于我國西北高原地區的鹽堿荒漠地帶，藏藥稱其果實為“旁瑪”，據《四部醫典》和《晶珠本草》等藏醫藥經典著作記載，可用于治療心熱病、心臟病、月經不調和停經等病癥。天然花青素類化合物由于可清除人體內代謝過程中產生的過多自由基，具有較強的防止活性氧危害及抗氧化活性，對于疾病的防治起著重要作用。?

目前，針對黑果枸杞果實中花青素的提取，趙曉輝等公布了一種采用膜分離技術制備黑果枸杞原花青素產品的方法（黑果枸杞原花青素產品及其制備方法，申請號：201010525734.3），該方法包括以下步驟：黑果枸杞鮮果榨汁→陶瓷膜過濾→濾液過非極性大孔樹脂柱→水洗→乙醇洗脫得含原花青素的洗脫液→有機膜處理洗脫液得原花青素精提液→噴霧干燥得產品。該方法主要是通過不同粒度的有機膜來處理樣品，得到的原花青素樣品中必然含有大量與黑果枸杞中花青素類化合物分子量接近的其他成分，同時，果渣中的花青素成分被浪費了，資源沒有得到充分利用；最后的干燥工藝用的是噴?霧干燥，由于其溫度較高，花青素成分易被氧化破壞；并且申請者沒有公布這些原花青素產品主要包括哪些花青素化合物，也沒有公布其含量測定的方法，很難保證產品的質量。另外，丁晨旭等也公布了一種從黑果枸杞果實中提取花色苷的方法（申請號：201010571739.X），該方法通過以下步驟完成：黑果枸杞果實用pH=1～4的乙醇溶液浸提，過濾，得浸提液→減壓濃縮至固形物濃度大于40%的濃縮液→聚苯乙烯大孔樹脂吸附濃縮液，用乙醇水溶液洗脫，當顏色變深時開始收集，得純化的黑果枸杞果實花色苷提取液→減壓濃縮得固形物大于60%的濃縮液，然后冷凍干燥的黑果枸杞果實花色苷產品。該方法提取時用的是酸性乙醇溶液，在上樹脂前需要濃縮除去乙醇，需要耗能，同時，會將很多非花色苷的醇溶性成分帶入產品中；另外，提取濃縮液用大孔樹脂吸附后，直接用乙醇水溶液洗脫，會使得其大量的糖類成分沒有被除去而帶入產品中，影響產品花色苷的純度，且會有較多花青素成分洗脫不下來，造成不必要的浪費。最為主要的是這兩個提取方法得到的產品成分不清楚，也沒有質量控制方法，產品質量難以保證。發明內容?

本發明的目的是公開一種黑果枸杞果實提取物及制備方法和應用，以滿足臨床應用的需要。?

所述的黑果枸杞果實提取物，是采用包括如下步驟的方法制備的：?

（1）提取：將黑果枸杞果實，加入重量濃度為1～2‰酸的水溶液，溫度10～60℃攪拌提取，提取時間為1～3小時，優選提取1～3次，每次0.5～1小時，過濾收集提取液；?

酸的水溶液的重量用量為黑果枸杞果實的8～12倍；?

所述的酸選自鹽酸、醋酸、甲酸、檸檬酸、草酸或磷酸；?

（2）吸附：將步驟（1）中得到的提取液，通過裝有聚苯乙烯—二乙烯苯大孔樹脂的層析柱，使黑果枸杞果實提取液得到選擇性充分吸附；?

（3）洗脫：先用水洗脫步驟（2）中吸附了黑果枸杞果實提取液的層析柱，直至洗脫液為中性或檢測無糖反應，再用洗脫液洗脫，收集層析柱流出的洗脫液；?

所述洗脫液由如下重量百分比的組分組成：?

酸??????????????????????????0.1～2‰?

體積濃度為75%的乙醇水溶液????余量?

洗脫液的重量用量為步驟（1）中黑果枸杞果實重量的15～20倍；?