[發明專利]一種非洲豬瘟PCR檢測方法及寡核苷酸引物對有效
| 申請號: | 201310272907.9 | 申請日: | 2013-07-01 |
| 公開(公告)號: | CN103320536A | 公開(公告)日: | 2013-09-25 |
| 發明(設計)人: | 單虎;張傳美;秦曉冰;王述柏;黃娟;楊瑞梅;陳琳琳 | 申請(專利權)人: | 青島農業大學 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 266109 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 非洲 豬瘟 pcr 檢測 方法 寡核苷酸 引物 | ||
1.一種用于檢測非洲豬瘟的PCR方法,其特征在于:該方法是針對GenBank上已發表的非洲豬瘟P72蛋白的基因序列,經過反復比對,選取其高度保守區域,設計合成引物,選取最佳退火溫度和反應體系,針對非洲豬瘟病毒建立的PCR檢測方法。
2.根據權利要求1所述的檢測非洲豬瘟的PCR方法,其特征在于,參照GenBank收錄的23株ASFVP72蛋白全基因序列,通過DNAStar軟件中的MegLign比對,選擇保守區域為引物設計區,參照ASFV的經典毒株BA71V株的核酸序列,通過Prime5軟件設計一對特異性引物。
3.根據權利要求2所述的檢測非洲豬瘟的PCR方法,其特征在于,所述寡核苷酸引物對序列如下:
4.根據權利要求3所述的檢測非洲豬瘟的PCR方法,其特征在于,PCR最佳反應條件:95℃5min;94℃30s,55℃40s,72℃1min,循環35次;72℃延伸10min。
5.一種用于非洲豬瘟檢測的PCR寡核苷酸引物對,其序列如下:
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