[發明專利]一株藤黃灰鏈霉菌YAAS0018菌株及其抗十字花科根腫病微生物制劑與應用

無效

• 申請號: 201310272882.2
• 申請日: 2013-07-02
• 公開（公告）號: CN103289943A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發明（設計）人: 楊佩文;楊明英;曹繼芬;李向東;曾莉;畢云青;裴衛華;趙志堅;李元廣;周麗鳳
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院農業環境資源研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P1/00;C12R1/465
• 代理公司: 昆明合眾智信知識產權事務所 53113
• 代理人: 康珉

1.藤黃灰鏈霉菌（Streptomyces?luteogriseus）YAAS0018CGMCC?No.7628。

2.一種抗十字花科根腫病微生物制劑的制備方法，其其特征在于步驟如下：

（1）試管種培養

將藤黃灰鏈霉菌（Streptomyces?luteogriseus）YAAS0018CGMCC?No.7628菌株接種到試管固體培養基斜面上，于28℃下培養7天，獲得試管種；所述的試管固體培養基的配方為：酵母膏4g，葡萄糖4g，麥芽膏5g，維生素B₁1mg，維生素B₆1mg，核黃素1mg，煙酸1mg，苯丙氨酸1mg，生物素1mg，丙氨酸0.3mg，FeSO₄·7H₂O20mg，MnCl₂·2H₂O10mg，ZnSO₄·7H₂O10mg，瓊脂20g，水1000ml，pH7.8；

（2）液體種子培養

采用三角瓶搖瓶培養，方法是：

①配制液體種子培養基，按液體種子培養基配方所述的各成分及其含量混合而成液體種子培養基；所述的液體種子培養基的配方是：酵母膏4g，葡萄糖4g，麥芽膏5g，維生素B₁1mg，維生素B₆1mg，核黃素1mg，煙酸1mg，苯丙氨酸1mg，生物素1mg，丙氨酸0.3mg，FeSO₄·7H₂O20mg，MnCl₂·2H₂O10mg，ZnSO₄·7H₂O10mg，瓊脂20g，水1000ml，pH7.8；

②在每個三角瓶中裝入100ml所述的液體種子培養基，121°C滅菌30min，冷卻后接入試管種，28°C下于轉速為220rpm的搖床上培養72h；

（3）制備所述的抗十字花科根腫病微生物制劑

采用三角瓶搖瓶培養，方法是：

①配制液體發酵培養基，按液體發酵培養基配方所述的各成分及其含量混合而成液體發酵培養基；液體發酵培養基配方是：大豆粉20g，甘露醇20g，自來水1000ml，pH7.8；

②在每個三角瓶中裝入200ml液體發酵培養基，121°C滅菌30min，冷卻后接入10ml步驟（2）培養得到的液體種子，28°C下于轉速為220rpm的搖床上培養120h得發酵液。

③在發酵液中加入等體積的質量分數為95%的乙醇，經搖床振蕩10h后，用轉速為4000rpm的離心機離心15min，取上清液并在旋轉蒸發儀上55°C蒸發去除乙醇，用水稀釋到原發酵液體積，即成為所述的抗十字花科根腫病微生物制劑。

3.一種抗十字花科根腫病微生物制劑，其特征在于：按權利要求2所述的抗十字花科根腫病微生物制劑的制備方法制備得到。

4.一種抗十字花科根腫病微生物制劑，含有權利要求1所述的藤黃灰鏈霉菌（Streptomyces?luteogriseus）YAAS0018CGMCC?No.7628。

5.權利要求1所述的藤黃灰鏈霉菌（Streptomyces?luteogriseus）YAAS0018CGMCC?No.7628在抗十字花科根腫病中的應用。

6.權利要求3或4所述的抗十字花科根腫病微生物制劑在抗十字花科根腫病中的應用。

7.權利要求1所述的藤黃灰鏈霉菌（Streptomyces?luteogriseus）YAAS0018CGMCC?No.7628的保存方法，其步驟如下：

（1）短期保存：將藤黃灰鏈霉菌（Streptomyces?luteogriseus）YAAS0018CGMCC?No.7628菌株接種在試管固體培養基斜面上，待菌苔長滿后，移至2—8℃的冰箱中保藏，所述的試管固體培養基的配方是：酵母膏4g，葡萄糖4g，麥芽膏5g，維生素B₁1mg，維生素B₆1mg，核黃素1mg，煙酸1mg，苯丙氨酸1mg，生物素1mg，丙氨酸0.3mg，FeSO₄·7H₂O20mg，MnCl₂·2H₂O10mg，ZnSO₄·7H₂O10mg，瓊脂20g，水1000ml，pH7.8。

（2）長期保存：將藤黃灰鏈霉菌（Streptomyces?luteogriseus）YAAS0018CGMCC?No.7628菌株接種在裝有脫脂牛奶的安瓿管中，待菌苔長滿后，用真空泵抽氣至干，熔封后-20℃低溫保存。