[發明專利]一種植物根邊緣細胞無菌培養裝置與方法

有效

• 申請號: 201310272549.1
• 申請日: 2013-06-28
• 公開（公告）號: CN103333801A
• 公開（公告）日: 2013-10-02
• 發明（設計）人: 彭程;施積炎;何俊昱;劉婷婷;宋婕
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12N5/04;A61L2/10
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 杜軍

1.一種植物根邊緣細胞無菌培養裝置，其特征在于包括立方體柜、滑輪軌道、軌道處滑輪、抽屜隔板、開關門、開關門合頁、磁碰、拉手、紫外滅菌燈、萬向輪。

2.如權利要求1所述的植物根邊緣細胞無菌培養裝置，其特征在于所述的立方體柜由六面圍合而成，內部中空；其一個側面設置有開關門，開關門的下沿距離立方體柜下底面5cm，上沿與立方體柜上表面邊沿重合。

3.如權利要求1所述的植物根邊緣細胞無菌培養裝置，其特征在于所述的開關門與相鄰的左右側面活動連接，其外壁上設置有拉手；與開關門相鄰的一個側面內壁上設置有磁碰，磁碰與靠近開關門的側壁內邊沿重合，且開關門內壁設置有與該磁碰相對應的鐵塊；開關門與相鄰的另一個側面通過開關門合頁相連接。

4.如權利要求1所述的植物根邊緣細胞無菌培養裝置，其特征在于所述的與開關門相鄰的左右側面內壁上，距下表面三分之二處設置有滑輪軌道，且滑輪軌道靠近開關門的一端設置有軌道處滑輪；抽屜隔板上設置有抽屜隔板上滑輪，并通過抽屜隔板上滑輪與滑輪軌道相連接；紫外滅菌燈設置在立方體柜的內側面上，該內側面與開關門對應，且紫外滅菌燈位于立方體柜上表面與抽屜隔板之間。

5.如權利要求1所述的植物根邊緣細胞無菌培養裝置，其特征在于所述的立方體柜的上表面開有多個通孔，用于氣體流動，通孔上方設置有直徑大于通孔直徑、孔徑為0.22微米的濾膜，用于濾除空氣中微生物。

6.如權利要求1所述的植物根邊緣細胞無菌培養裝置，其特征在于所述的立方體柜的下表面開有底部排水孔，且設置有配套閥門，其四個直角端設置有萬向輪，立方體柜中與開關門對應的側面設置有電源線孔。

7.如權利要求1所述的植物根邊緣細胞無菌培養裝置，其特征在于所述的紫外滅菌燈帶有防水罩；所述的抽屜隔板上設置有多個通孔，其上鋪有兩層浸濕紗布。

8.一種植物根邊緣細胞無菌培養方法，其特征在于包括下列步驟：

步驟(1)：挑選顆粒均勻飽滿的植物種子，自來水洗凈后用10%次氯酸鈉溶液浸種10min用于種子表面殺菌，超純水充分清洗后置于超純水中浸泡6小時；

步驟(2)：將浸泡后的種子轉移至蓋有濕潤紗布的培養皿中，置于黑暗環境下25℃的恒溫培養箱中萌發；

步驟(3)：準備好所用的植物根邊緣細胞無菌培養裝置

準備包括：植物根邊緣細胞無菌培養裝置的立方體柜上表面通孔處粘貼孔徑為0.22微米的濾膜，在抽屜隔板上放兩層經高溫滅菌的浸濕紗布，將開關門打開，放入盛有無菌水配置的0.1mM?氯化鈣溶液的加濕器后關閉開關門，利用紫外滅菌燈進行紫外滅菌；

步驟(4)：待種子露白后將其均勻鋪置于植物根邊緣細胞無菌培養裝置中的抽屜隔板紗布上；加濕器噴霧培養48～72h，每隔5min噴霧一次，每次噴霧30s，晝夜溫度為26～22℃，避光；培養結束后，打開裝置開關門，抽出抽屜隔板對植物根邊緣細胞進行原位采樣；

所述的植物根邊緣細胞無菌培養裝置中，種子需垂直放置以防止邊緣細胞的掉落；所述的實驗中所用的裝置和容器都需經紫外滅菌，所有溶液需采用無菌水配制；所述的噴霧流量可調節加濕器開關進行控制；所述的噴霧間隔時間可通過植物根邊緣細胞無菌培養裝置外加濕器插頭連接的定時器加以控制。